無抗發(fā)酵飼料對生長育肥豬生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)和肉品質(zhì)的影響
導(dǎo)讀
我國因?yàn)E用抗生素、激素和違禁藥品飼喂畜禽，食品安全事件頻發(fā)，引起了政府和廣大消費(fèi)者的高度關(guān)注。新型、綠色、無公害生物飼料可以有效解決飼料安全帶來的肉食品安全問題，已經(jīng)成為行業(yè)專家的研究熱點(diǎn)。
生物飼料的一個重要研究方向是微生物固態(tài)發(fā)酵飼料。當(dāng)前各種發(fā)酵型雜粕等蛋白飼料原料在生豬養(yǎng)殖上的應(yīng)用試驗(yàn)研究較多，而微生物發(fā)酵全價(jià)飼料，特別是微生物發(fā)酵無抗生素的全價(jià)飼料在生豬生長全階段（20～120kg）飼喂使用的報(bào)道則較少見，因此，本試驗(yàn)在４個不同處理的復(fù)合益生菌發(fā)酵不含抗生素全價(jià)飼料對仔豬進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)基礎(chǔ)上，挑選對照組和最佳劑量發(fā)酵飼料添加組（20%），進(jìn)一步研究復(fù)合益生菌發(fā)酵無抗飼料與含抗生素日糧對比對生長肥育豬（20～110kg）全階段生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)、免疫性能以及肉品質(zhì)的影響，旨在為研發(fā)綠色安全環(huán)保型無抗發(fā)酵飼料并規(guī)?；瘧?yīng)用提供理論和技術(shù)支持。
1材料和方法
1.1復(fù)合益生菌制劑和無抗發(fā)酵全價(jià)配合飼料
本試驗(yàn)中的復(fù)合微生態(tài)益生菌制劑由湖南省微生物研究院動物微生物研究室提供，活菌數(shù)為≥2×109 cfu／mL。復(fù)合益生菌制劑主要成分為枯草芽胞桿菌、乳酸桿菌和釀酒酵母菌等。發(fā)酵的底物為生長育肥豬全價(jià)配合粉料，發(fā)酵時(shí)發(fā)酵液接種比例5％，添加水分質(zhì)量比35％，飼料和液體質(zhì)量比為6∶4。發(fā)酵飼料發(fā)酵3ｄ以上可以使用，保質(zhì)期在密封條件下為1個月左右。發(fā)酵時(shí)間少于3ｄ飼料發(fā)酵程度不夠，發(fā)酵時(shí)間過長容易造成飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，一般在保質(zhì)期1個月內(nèi)使用完畢效果最佳。
1.2試驗(yàn)動物和分組
將60頭18ｋｇ左右的杜洛克×長白×大白雜交保育仔豬按照體質(zhì)量大小和公母大致各半的原則完全隨機(jī)分作２個處理，每處理設(shè)３個重復(fù)，每重復(fù)的單欄內(nèi)放入10頭仔豬。以豬場使用的常規(guī)含抗生素日糧為基礎(chǔ)對照日糧，作為對照組Ａ；以質(zhì)量百分比80％不含抗生素的基礎(chǔ)對照日糧和２０％的無抗發(fā)酵全價(jià)飼料組成試驗(yàn)組日糧，設(shè)定為試驗(yàn)組Ｂ。２個處理組分別飼喂相對應(yīng)日糧。試驗(yàn)于2013年在湖南永州某公司豬場進(jìn)行。
１.３試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧
為了試驗(yàn)操作簡便，兼顧生長豬和育肥豬兩階段的營養(yǎng)需要，整個試驗(yàn)期使用相同日糧配方，其配方組成及營養(yǎng)指標(biāo)見表１。
其中對照組預(yù)混料為每千克全價(jià)料提供Cu40ｍｇ；Fe100ｍｇ；Zn 80mg；Mn 40ｍｇ；I１mg；Se0.3ｍｇ；VA9000IU；VD31200IU；VE80IU；VK4ｍｇ；VB36mg；VB320mg；煙酸20mg；泛酸15mg；生物素0.3mg；膽堿300mg；含抗生素黃霉素10mg。試驗(yàn)組預(yù)混料在對照組預(yù)混料基礎(chǔ)上去除抗生素，其余完全一致。
無抗飼料發(fā)酵前和發(fā)酵7ｄ后成分檢測結(jié)果：發(fā)酵前飼料營養(yǎng)成分檢測值為粗蛋白16.6％，鈣0.58％，總磷0.49％，無機(jī)磷0.30％；發(fā)酵7ｄ后飼料營養(yǎng)成分檢測值為粗蛋白16.7％，鈣0.58％，總磷0.50％，無機(jī)磷0.36％，乳酸菌3.0×109 cfu／ｇ，枯草芽孢桿菌4.8×109 cfu／ｇ，酵母菌5.0×107cfu／ｇ。發(fā)酵前飼料中賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和色氨酸檢測值分別為0.811％、0.264％、0.632％、0.798％；發(fā)酵７ｄ后飼料中賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和色氨酸檢測值分別為0.836％、0.271％、0.629％、0.195％。
1.4飼養(yǎng)管理
按豬場常規(guī)飼養(yǎng)管理程序進(jìn)行。預(yù)試期3d，正試期后各組分別使用相應(yīng)日糧飼喂。自由飲水采食，免疫按豬場正常程序。試驗(yàn)期154ｄ。
1.5測定指標(biāo)
１）生產(chǎn)性能指標(biāo)測定。①平均日增重：對各欄試驗(yàn)豬于試驗(yàn)開始當(dāng)天和試驗(yàn)結(jié)束最后一天早上08：00空腹稱質(zhì)量，根據(jù)初質(zhì)量和末質(zhì)量以及試驗(yàn)天數(shù)計(jì)算平均日增重。②平均采食量：記錄各組每周的采食量（試驗(yàn)組按照飼喂基礎(chǔ)量的0.92倍系數(shù)換算成與對照組同樣的風(fēng)干型日糧質(zhì)量），試驗(yàn)結(jié)束后結(jié)算各組消耗飼料，計(jì)算出平均日采食量。③料重比：根據(jù)日增重和采食量計(jì)算。
２）血液生化和免疫指標(biāo)測定。試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天早晨從各組隨機(jī)抽出3頭接近中等體質(zhì)量空腹肉豬，經(jīng)耳靜脈采血各5mL，全血置于采血管中15～30°角度斜面靜置自然析出血清，3000ｒ／min離心15min，用無菌注射器取上部透明血清于離心管中，記號筆標(biāo)寫清楚。將各血清樣品分成3～4份到1ｍＬ塑料離心管并放入移動式低溫保藏箱，迅速送到市人民醫(yī)院檢測，采用日立7020全自動生化分析儀測定以下指標(biāo)：血清堿性磷酸酶、血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、血清尿素氮、血清葡萄糖、血清總蛋白，血清白蛋白、血清球蛋白。血清免疫球蛋白（IgA、IgG 和IgM）采用免疫透射比濁法測定。
３）肉質(zhì)指標(biāo)測定。每個處理組選?。愁^接近平均體質(zhì)量的豬屠宰，宰后0.5～2.0ｈ內(nèi)，取胸腰椎結(jié)合處至第2腰椎處背最長肌進(jìn)行pH、肉色的測定；取第2～5腰椎處背最長?。ū渲斜４妫┯糜诘嗡畵p失、嫩度和肌內(nèi)脂肪測定。
分別在屠宰后的45min和2ｈ測定肌肉pH，將肉食品專用pH 計(jì)（德國德圖儀器公司Testo－205）探針插入取樣豬肉表面向內(nèi)約2.5cm深處，讀取數(shù)據(jù)。
肉色測定采用CIELAB系統(tǒng)，用SC－8C型全自動色差計(jì)（北京康光儀器有限公司，北京），屠宰后立即測定采樣豬肉的L* 值、a* 值和b* 值。L* 、a* 和b* 分別表示亮度、紅度和黃度，值越大表示對應(yīng)的顏色越深。
肌肉嫩度測定：將屠宰后取樣豬肉用塑料袋密封，肉樣中間插入溫度計(jì)，在80 ℃ 水中煮約10min，等溫度計(jì)顯示溫度達(dá)到75℃，取出樣品，查明肌纖維走向，沿肌纖維走向修剪成截面1.27cm×1.27cm左右的肉條。上機(jī)測定時(shí)，肌纖維走向與刀口垂直。采用C-LM3型數(shù)字嫩度計(jì)測定肌肉嫩度（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，哈爾濱），測試刀頭行走速度200ｍｍ／min，記錄單位為牛，N。
背最長肌的肌內(nèi)脂肪測定采用有機(jī)溶劑正己烷進(jìn)行索氏脂肪抽提，以脂肪含量占肌肉組織鮮質(zhì)量的百分比表示測定結(jié)果。
1.6數(shù)據(jù)處理
數(shù)據(jù)采用SAS軟件進(jìn)行ｔ檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0.05作為數(shù)據(jù)結(jié)果差異是否顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2結(jié)果與分析
2.1無抗發(fā)酵飼料對生長育肥豬生產(chǎn)性能的影響
在試驗(yàn)期內(nèi)，對照飼喂含有抗生素的基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組飼喂含20％無抗發(fā)酵飼料的日糧，2個處理組對生長育肥豬生產(chǎn)性能的影響見表2。
從表2可知：20％無抗發(fā)酵飼料添加試驗(yàn)處理組的結(jié)束平均頭質(zhì)量、平均日增重和平均日采食量都顯著高于對照組，而試驗(yàn)組的耗料增重比則顯著低于對照組。與對照組比較，試驗(yàn)組平均日增重提高10.89％，平均日采食量提高5.86％，耗料增重比降低4.38％。
2.2無抗發(fā)酵飼料對生長肥育豬血液生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)的影響
無抗發(fā)酵飼料對生長肥育豬血液生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)的影響見表3。
由表3可見：試驗(yàn)組（無抗飼料添加組）的血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素、白蛋白和白球比例都顯著低于對照組；而試驗(yàn)組的血清堿性磷酸酶、葡萄糖、球蛋白和IgG則顯著高于對照組。2個處理組間血清總蛋白、IgM 和IgA檢測數(shù)值差異不顯著。
2.3無抗發(fā)酵飼料對生長肥育豬肉品質(zhì)的影響
無抗發(fā)酵飼料對生長肥育豬肉品質(zhì)的影響見表4。由表4可見，2個處理組之間屠宰豬肉的亮度值（L*）和黃度值（b* ）差異不顯著。試驗(yàn)處理組屠宰豬肉的45minpH、2hpH、紅度值（a*）和肌內(nèi)脂肪顯著高于對照組，與對照組比較分別提高3.09％、2.11％、8.06％和28.06％；試驗(yàn)處理組屠宰豬肉的滴水損失和剪切力顯著低于對照組，與對照組比較分別降低36.24％和29.41％。
3討 論
3.1無抗發(fā)酵飼料對生長育肥豬生產(chǎn)性能的影響
本試驗(yàn)中發(fā)酵無抗飼料采用的復(fù)合微生態(tài)制劑是由乳酸菌、枯草芽胞桿菌和釀酒酵母菌按照1∶1∶1比例組成的。生產(chǎn)的發(fā)酵飼料中除了含有活的益生菌，還有其代謝過程產(chǎn)生的淀粉酶、蛋白酶和纖維素酶等消化酶。飼料的發(fā)酵過程可以將飼料蛋白部分分解為小肽和游離氨基酸，可以賦予發(fā)酵飼料酸香味，改善適口性，促進(jìn)采食，提高飼料的消化率和增加動物對飼料的消化能力，提高動物的生長性能。在本試驗(yàn)中，試驗(yàn)組添加20％無抗發(fā)酵飼料明顯比對照組的平均日增重、平均日采食量、耗料增重比都要好。這個結(jié)果與前人的研究報(bào)道基本一致。比如劉瑞麗等研究發(fā)現(xiàn)飼料經(jīng)復(fù)合益生菌（主要成分為：芽胞桿菌、乳酸桿菌、酵母菌等）發(fā)酵后，品質(zhì)得到改善，其最佳發(fā)酵時(shí)間為6ｄ，具有改善肥育豬生產(chǎn)性能的效果，與本試驗(yàn)研究結(jié)果一致。眾多研究者發(fā)現(xiàn)發(fā)酵飼料在生長肥育豬上使用都可以取得較好的經(jīng)濟(jì)效益。張?jiān)朴暗韧ㄟ^在育肥豬日糧中添加20％袋裝厭氧固態(tài)發(fā)酵飼料，發(fā)現(xiàn)對降低藥費(fèi)開支、提高豬群采食量、提高育肥豬日增重均有良好效果，試驗(yàn)組平均盈余比對照組多出31.36元／頭。發(fā)酵飼料在肥育豬飼糧中等量代替5％的豆粕，能顯著提高肥育豬增重，降低料重比，飼料成本下降，經(jīng)濟(jì)效益提高。黃印堯等應(yīng)用酒糟益生菌發(fā)酵飼料喂豬，結(jié)果表明每頭出欄肥豬可以降低飼料成本達(dá)60元。曹啟民等在基礎(chǔ)飼料中添加20％的自制靈芝菌糠發(fā)酵飼料對豬的生長性能未產(chǎn)生顯著影響，但是可降低每千克增重飼料成本約5.19％。肖軻等飼喂低劑量發(fā)酵飼料組（添加量為7.5％，菌種組合為乳酸菌、釀酒酵母和芽孢菌）平均日增重高于對照組和高劑量發(fā)酵飼料添加組（添加量為15％），而高劑量發(fā)酵飼料添加組優(yōu)于對照組。在發(fā)酵飼料的添加劑量上大家的研究結(jié)果不盡相同，可能和各個試驗(yàn)具體使用的益生菌菌群組合、發(fā)酵飼料中是否添加抗生素、全價(jià)料的配方組成以及試驗(yàn)豬只品種等因素的差異性有關(guān)。
3.2無抗發(fā)酵飼料對生豬育肥豬血液生化指標(biāo)和免疫功能指標(biāo)的影響
機(jī)體新陳代謝產(chǎn)生的變化可以通過血液生化指標(biāo)的變化表現(xiàn)出來。血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是肝臟和心臟器官功能反映的重要指標(biāo)，如果其指標(biāo)水平過高，說明相應(yīng)的器官可能受到一定損傷。
血清堿性磷酸酶活性和機(jī)體生長緊密相關(guān)，堿性磷酸酶水平的升高就表示成骨細(xì)胞活性提高，骨質(zhì)生成旺盛，骨中鈣、磷的沉積增加。唐曉玲等認(rèn)為血清中堿性磷酸酶檢測水平的高低與動物的生長速度密切相關(guān)。本試驗(yàn)中20％無抗發(fā)酵飼料添加組肉豬的堿性磷酸酶活性顯著高于含抗生素日糧的對照組，進(jìn)一步確證了益生菌發(fā)酵飼料能夠提高肉豬生長性能。
動物體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況可以通過血清尿素氮含量準(zhǔn)確反映出來，氨基酸平衡較好時(shí)則血清尿素氮含量下降。血清尿素氮含量容易受到飼料中蛋白質(zhì)、氨基酸含量與質(zhì)量等因素的影響，其濃度與體內(nèi)氮沉積率、蛋白質(zhì)或氨基酸利用率呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系。
本試驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果表明，無抗發(fā)酵飼料組的血清尿素氮含量明顯低于對照組，表明益生菌發(fā)酵飼料可提高動物機(jī)體氮沉積，增加蛋白質(zhì)合成，提高生長速度。2種飼料血清尿素氮差異可能與飼料中氨基酸組成和平衡有關(guān)。本試驗(yàn)中通過益生菌發(fā)酵后飼料中賴氨酸含量有明顯增加，其他氨基酸檢測數(shù)值變化不大。本試驗(yàn)無抗發(fā)酵飼料對生長育肥豬血液各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果與以前研究結(jié)果基本一致。血清中總蛋白濃度反映了機(jī)體對蛋白的吸收情況和體液免疫的關(guān)系。白蛋白對肝臟在蛋白代謝中起著重要作用。血清球蛋白是機(jī)體免疫器官制造的，對機(jī)體免疫力具有重要作用，免疫水平的高低間接反映了機(jī)體對疾病的抵抗能力。本試驗(yàn)結(jié)果顯示無抗發(fā)酵飼料與有抗生素的對照組比較，對育肥豬的血清中總蛋白、IgM 和IgA無差異顯著性影響，但是顯著提高血清中球蛋白和IgG水平；表明生長育肥豬日糧中添加微生物發(fā)酵飼料有助于提高其機(jī)體的免疫能力，與眾多研究結(jié)果基本一致。但是肖軻等飼喂肥豬低劑量發(fā)酵飼料組（添加量為7.5％，菌種組合為乳酸菌、釀酒酵母和芽胞菌）血清中白蛋白含量、尿素氮含量均高于對照組和高劑量發(fā)酵飼料添加組（添加量為15％），部分血液生化指標(biāo)變化規(guī)律與本試驗(yàn)不一致。
益生菌發(fā)酵飼料能夠提高動物的免疫力，其作用機(jī)理可能有以下五方面原因：
（１）腸道中的優(yōu)勢益生菌群可以促進(jìn)機(jī)體免疫器官發(fā)育和成熟，提高Ｔ、Ｂ淋巴細(xì)胞的數(shù)量，啟動免疫應(yīng)答；
（２）有益菌在腸道粘膜定植能激活腸道粘膜的免疫功能，誘導(dǎo)淋巴組織漿細(xì)胞生成分泌型免疫球蛋白（sIgA），提高免疫功能；
（３）益生菌可以激活腸黏膜上的巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和自然殺傷（NK）細(xì)胞，調(diào)節(jié)細(xì)胞因子（白細(xì)胞介素、干擾素（IN）－γ等）產(chǎn)生量來調(diào)控T、B淋巴細(xì)胞分化方向；
（４）益生菌（地衣和枯草芽胞桿菌等）經(jīng)由直接或間接途徑發(fā)揮其免疫佐劑樣作用，增強(qiáng)接種疫苗抗體水平；
（５）益生菌能代謝合成細(xì)菌素類物質(zhì)，激活機(jī)體免疫系統(tǒng)。
３.３無抗發(fā)酵飼料對生長肥育豬肉品質(zhì)的影響
本試驗(yàn)中，無抗發(fā)酵飼料添加可以有效改善育肥豬的肉品質(zhì)，提高了屠宰后pH值、肉色紅度值、肌肉嫩度、肌內(nèi)脂肪含量，降低了滴水損失，試驗(yàn)結(jié)果和前人研究基本一致。肌內(nèi)脂肪是肉質(zhì)的一項(xiàng)重要評定指標(biāo)，隨著肌內(nèi)脂肪含量的增高，肌束易于分離和咀嚼，肉的嫩度和風(fēng)味得以改善。發(fā)酵飼料能夠減少肌肉剪切力，提高肉質(zhì)嫩度，可能和發(fā)酵飼料可以增加肌內(nèi)脂肪有關(guān)。沈彥鋒等試驗(yàn)主要研究生物發(fā)酵飼料對魯萊黑豬肥育豬生長及肉質(zhì)特性的影響發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組豬肉保水能力、瘦肉率、pH顯著高于對照組，但是試驗(yàn)組肌內(nèi)脂肪數(shù)值上低于對照組，與本試驗(yàn)不一致。發(fā)酵飼料能夠改善肉品質(zhì)可能與發(fā)酵改變了飼料中的呈味氨基酸和小肽組成密切相關(guān)。張?jiān)朴暗韧ㄟ^在育肥豬日糧中添加20％袋裝厭氧固態(tài)發(fā)酵飼料，發(fā)現(xiàn)可以降低藥費(fèi)開支，尤其是發(fā)酵飼料添加試驗(yàn)組育肥豬不使用任何藥物，徹底解決了藥物殘留問題。
綜合本試驗(yàn)結(jié)果可見，在生長育肥全階段合理添加使用益生菌發(fā)酵無抗飼料能提高其生產(chǎn)性能，增強(qiáng)免疫能力，提高屠宰豬肉肉品質(zhì)。可以實(shí)現(xiàn)無抗健康生豬養(yǎng)殖，生產(chǎn)安全優(yōu)質(zhì)無抗豬肉，可以滿足市場對豬肉安全和優(yōu)質(zhì)的雙重需求，產(chǎn)生巨大的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。
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