前言

近年來(lái)，隨著(zhù)集約化、規?；B殖的迅速發(fā)展，動(dòng)物免疫力下降、疾病頻發(fā)、用藥頻繁、畜產(chǎn)品質(zhì)量降低等問(wèn)題日漸凸顯，逐漸成為了消費者關(guān)注的焦點(diǎn)。因此，在動(dòng)物飼糧中添加綠色添加劑來(lái)提高動(dòng)物生長(cháng)性能、增強免疫功能、調節腸道健康、改善肉品質(zhì)成為目前的研究熱點(diǎn)。酶制劑、益生菌是動(dòng)物生產(chǎn)中研究較為廣泛的飼料添加劑，具有提高動(dòng)物生長(cháng)性能、增強免疫力、改善腸道健康、提高肉品質(zhì)等功能。研究表明，在生長(cháng)豬飼糧中添加復合酶可顯著(zhù)提高平均日增重（ADG）、干物質(zhì)和氮的表觀(guān)消化率，顯著(zhù)降低飼料成本。研究表明，在飼糧中添加復合酶（淀粉酶、蛋白酶、木聚糖酶）可調節腸道菌群平衡和腸道短鏈脂肪酸（SCFAs）水平。復合益生菌可顯著(zhù)提高豬只生長(cháng)性能，降低血清白介素6（IL-6）、干擾素γ（IFN-γ）及排泄物中NH和HS的濃度，調節SCFAs水平。目前有關(guān)酶制劑、益生菌等單一物質(zhì)在動(dòng)物生產(chǎn)中的應用較多，酶制劑、益生菌聯(lián)合應用的效果及機制有待深入研究?；诖?，本試驗旨在研究飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬生長(cháng)性能、肉品質(zhì)、抗氧化性能及腸道SCFAs的影響，以期為益生菌、酶制劑在養豬生產(chǎn)中的聯(lián)合應用提供科學(xué)依據。

01材料與方法

1.1試驗材料

復合益生菌由本實(shí)驗室自主培養制備，含植物乳桿菌、銀杏乳酸菌和釀酒酵母，每種菌添加量均為0.5×109CFU/kg。酶制劑提供，含有蛋白酶（活力為36000U/g）和淀粉酶（中溫α淀粉酶活力為1000U/g、普魯蘭酶活力為100U/g、糖化酶活力為8000U/g。

1.2試驗設計與飼糧

選取日齡和體重相近（約45kg）的健康生長(cháng)豬（約克夏×榮昌）40頭，公母各半（公豬為閹公豬），隨機分為對照組和試驗組，每個(gè)組4個(gè)重復，每個(gè)重復5頭豬。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組飼喂基礎飼糧+0.1g/kg酶制劑+1.5×109CFU/kg復合益生菌。試驗預試期3天，正試期63天。試驗期間自由采食與飲水，免疫和飼養管理按常規方法進(jìn)行。每天監測豬群的健康狀況，記錄豬的死淘情況?；A飼糧為玉米-豆粕型無(wú)抗基礎飼糧，參照《豬營(yíng)養需要量》（GB/T39235—2020）配制，飼糧組成及營(yíng)養成分見(jiàn)表1。

1.3樣品采集及指標測定

1.3.1生長(cháng)性能

試驗期間，每天記錄各重復采食量，計算平均日采食量（ADFI）；在正式試驗開(kāi)始第1天和第63天早晨空腹8小時(shí)以上后稱(chēng)重，計算ADG和耗料增重比（F/G）。計算公式：

ADG（kg/d）=總增重/試驗天數

ADFI（kg/d）=飼糧消耗量/試驗天數

F/G=累計飼料消耗量/（末重−初重）

1.3.2肉品質(zhì)

在試驗第63天早晨，每個(gè)重復選取1頭接近平均體重的豬，空腹8h以上后屠宰，取左側胴體背最長(cháng)肌，參照《豬肉品質(zhì)測定技術(shù)規程》（NY/T821—2019）進(jìn)行肉品質(zhì)檢測。

1.3.3血清免疫指標

在試驗第63天早晨，每個(gè)重復選取l頭接近平均體重的豬，采集頸靜脈血10mL，置于促凝采血管中，靜置2~3h后4℃、3000r/min離心10min，取上清液分裝到1.5mL離心管中，并于-20℃保存備用。按照南京建成科技有限公司試劑盒說(shuō)明書(shū)測定豬血清中免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）和細胞因子（IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10）的含量，測定儀器為酶標儀（SynergyH1，GeneCompanyLimited）。

1.3.4肌肉抗氧化指標

屠宰后取左側胴體背最長(cháng)肌，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測肌肉丙二醛（MDA）、還原性谷胱甘肽（GSH）含量及總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化酶（GSH-Px）等指標。測定儀器為酶標儀（SynergyH1，GeneCompanyLimited）。

1.3.5盲腸內容物

SCFAs屠宰后迅速結扎盲腸兩端，取盲腸中段內容物分裝于數個(gè)無(wú)菌EP管中，液氮速凍后置于-80℃冰箱中保存待測。采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）測定盲腸內容物中SCFAs含量。

1.4統計分析

試驗數據采用SPSS26.0統計軟件進(jìn)行分析，分析方法為獨立樣本t檢驗。結果采用平均值±標準誤表示，其中，P>0.05為差異不顯著(zhù)，P<0.05為差異顯著(zhù)，0.05≤P<0.10作為趨勢性判斷標準。

02試驗結果

2.1飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬生長(cháng)性能的影響

由表2可知，與對照組相比，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑有提高豬只末重（P=0.09）、降低ADFI（P=0.09）和F/G（P=0.08）的趨勢，對ADG無(wú)顯著(zhù)影響（P>0.05）。

2.2飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬肉品質(zhì)的影響

由表3可知，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可提高生長(cháng)育肥豬屠宰后肌肉pH1、降低滴水損失（P

2.3飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬血液免疫指標的影響

由表4可知，與對照組相比，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可提高生長(cháng)育肥豬血清中IgA、IgG以及細胞因子IL-2、IL-10水平（P

2.4飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬肌肉抗氧化性能的影響

由表5可知，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬肌肉抗氧化性能均無(wú)影響（P>0.05）。

2.5飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬盲腸SCFAs的影響

由表6可知，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬盲腸SCFAs、含量無(wú)影響（P>0.05）

03討論

3.1飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬生長(cháng)性能的影響

研究表明，動(dòng)物飼糧中添加酶制劑和益生菌可提高其生長(cháng)性能。研究發(fā)現，在生長(cháng)育肥豬飼糧中添加0.01%蛋白酶可顯著(zhù)提高ADG、顯著(zhù)降低F/G。研究表明，在斷奶仔豬飼糧中添加復合益生菌（枯草芽孢桿菌、糞腸球菌）可顯著(zhù)提高ADG、ADFI，顯著(zhù)降低F/G。此外，在生長(cháng)豬飼糧中添加復合酶（木聚糖酶、β-葡聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶和植酸酶）可顯著(zhù)提高鈣和磷的表觀(guān)回腸消化率以及粗蛋白質(zhì)、鈣和磷的表觀(guān)總消化率，從而提高其生長(cháng)性能。本研究表明，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑有提高豬只末重、降低ADFI和F/G的趨勢，說(shuō)明飼糧中添加復合益生菌和酶制劑具有提高生長(cháng)育肥豬生長(cháng)性能的作用。這可能是因為外源益生菌在動(dòng)物腸道定植后，可增強動(dòng)物腸道微生物代謝；酶制劑可補充動(dòng)物體內含量不足和一些動(dòng)物自身不能合成的酶。由此可見(jiàn)，在飼糧中添加益生菌和酶制劑能促進(jìn)營(yíng)養物質(zhì)的消化吸收，從而提高動(dòng)物的飼料轉化3.2飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬肉品質(zhì)的影響

肉品質(zhì)是決定豬肉價(jià)值的重要因素。pH可通過(guò)調控蛋白質(zhì)活性影響肉的顏色、持水力。在本試驗中，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可顯著(zhù)提高豬肉pH，但對肉色L*、肉色a*、肉色b*沒(méi)有顯著(zhù)影響。持水力又稱(chēng)系水力，對肉的嫩度、顏色和營(yíng)養組成都有影響。本試驗表明，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可顯著(zhù)降低肌肉滴水損失，說(shuō)明飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可改善豬肉持水力，進(jìn)而改善豬肉品質(zhì)。發(fā)現，在斷奶仔豬飼糧中添加植物乳桿菌ZJ316可改善肌肉pH、硬度、黏性、咀嚼性和恢復力。表明在育肥豬飼糧中添加復合益生菌可提高肉色、降低滴水損失。也表明，育肥豬飼喂復合益生菌（枯草芽孢桿菌、釀酒酵母和羅伊氏乳桿菌）固態(tài)發(fā)酵飼料可顯著(zhù)降低豬肉的剪切力和滴水損失。綜合分析表明，在飼糧中添加益生菌和酶制劑可改善豬肉品質(zhì)。

3.3飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬血液免疫指標的影響

血清免疫指標可反映動(dòng)物機體的免疫水平、代謝情況及健康狀況。研究發(fā)現，在斷奶仔豬飼糧中添加復合酶（淀粉酶、蛋白酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶）可顯著(zhù)提高血清IgA、IgG和IgM濃度。研究表明，斷奶仔豬飼喂釀酒酵母發(fā)酵菜籽粕可顯著(zhù)降低血清IL-1β、IL-6濃度，顯著(zhù)增加IFN-γ濃度。研究表明，在斷奶仔豬飼糧中添加復合益生菌（丁酸梭菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌）可顯著(zhù)降低血清腫瘤壞死因子α（TNF-α）和IL-1β濃度。本試驗也表明與對照組相比，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可顯著(zhù)提高血清IgA、IgG、IL-2和IL-10水平。免疫球蛋白具有抗菌、抗病毒、抗感染等作用，白細胞介素是參與機體炎癥反應的重要因子，血液免疫球蛋白、白細胞介素濃度可以反映機體的免疫水平和健康狀況。分析可見(jiàn)，飼糧中添加復合益生菌與酶制劑可通過(guò)提高血液免疫球蛋白、白細胞介素的濃度增強動(dòng)物的血液免疫功能，從而保證機體健康。

3.4飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬肌肉抗氧化性能的影響

T-AOC、SOD、GSH和MDA都是機體抗氧化系統中的重要指標。T-AOC反映了機體內各種抗氧化分子的總體水平及機體的健康狀況。SOD是一種以超氧化物自由基為底物的重要抗氧化酶。GSH是反映機體所處氧化還原狀態(tài)的重要指標。MDA是脂質(zhì)氧化的終產(chǎn)物，可反映機體內脂質(zhì)過(guò)氧化程度及細胞損傷程度。研究發(fā)現，在飼糧中添加復合酶（真菌α-淀粉酶、酸性蛋白酶、木聚糖酶、β-甘露糖酶、葡萄糖氧化酶、酸性纖維素酶和半乳糖苷酶）可顯著(zhù)提高仔豬肝臟和血清中GSH-Px濃度，顯著(zhù)降低MDA濃度。研究表明，飼糧中添加益生菌（植物乳桿菌B90、釀酒酵母）和益生元（木糖、木三糖和木四糖）可提高斷奶仔豬結腸和血漿過(guò)氧化氫酶（CAT）、GSH-Px、SOD水平，降低結腸和血漿MDA、過(guò)氧化氫水平。研究表明，在飼糧中添加益生菌（丁酸梭菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌）和益生元（酵母細胞壁、低聚木糖）可顯著(zhù)提高豬只背最長(cháng)肌SOD活性、顯著(zhù)降低臀部肌肉MDA活性。Li等研究結果表明，飼糧中添加益生菌可顯著(zhù)降低斷奶仔豬脾臟、肝臟和空腸黏膜的MDA含量，顯著(zhù)提高肝臟和回腸黏膜的T-AOC。本試驗結果表明，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬抗氧化性能無(wú)顯著(zhù)影響。由T-AOC、MDA、GSH等抗氧化分子組成的非酶類(lèi)抗氧化系統和由GSH-Px、SOD、CAT等氧化還原酶組成的酶類(lèi)抗氧化系統共同調控機體的抗氧化性能。因此，飼糧中添加酶制劑、益生菌可通過(guò)調節M(mǎn)DA含量、T-AOC和SOD、CAT等酶活性調控機體的抗氧化性能。

3.5飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長(cháng)育肥豬盲腸SCFAs的影響

SCFAs是腸道微生物發(fā)酵利用食物中不可消化的碳水化合物的重要產(chǎn)物，主要包括乙酸、丙酸、丁酸等由1~6個(gè)碳原子組成的有機脂肪酸，具有調節腸道菌群平衡、增強腸道屏障功能、參與脂質(zhì)代謝、提高免疫力等生物學(xué)功能。研究發(fā)現，飼糧中添加菊粉和益生菌（釀酒酵母、乳酸菌）可改變豬腸道SCFAs的組成。研究表明，飼糧中添加復合酶（淀粉酶、蛋白酶和木聚糖酶）可顯著(zhù)提高仔豬盲腸和結腸乙酸、丙酸及總SCFAs含量。研究也表明，飼糧中添加益生菌（腸球菌、乳酸菌和雙歧桿菌）可顯著(zhù)增加結腸乙酸含量。本試驗中，生長(cháng)育肥豬飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可增加盲腸丁酸含量，但差異不顯著(zhù)。這可能與復合益生菌和酶制劑組成或添加量有關(guān)研究發(fā)現，在生長(cháng)豬飼糧中添加不同含量復合益生菌（地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、釀酒酵母）對腸道SCFAs的影響不同，隨著(zhù)日糧中復合益生菌含量的增加，乙酸鹽、丁酸鹽和總SCFAs濃度呈線(xiàn)性增加，說(shuō)明復合益生菌對腸道SCFAs的影響與益生菌的添加量有關(guān)。

4、結論

本試驗結果表明，生長(cháng)育肥豬飼糧中添加0.1g/kg酶制劑和1.5×109CFU/kg復合益生菌可提高其生長(cháng)性能和免疫水平，改善肉品質(zhì)。

養殖專(zhuān)用加酶復合益生菌，養豬復合益生菌，養雞復合益生菌，鴨鵝養殖復合益生菌，牛羊養殖復合益生菌，特種動(dòng)物養殖復合益生菌，水產(chǎn)養殖復合益生菌

本產(chǎn)品運用復合益生菌與復合酶制劑具有使用量少，對動(dòng)物腸道有保健效果，還可以提高對飼料的消化吸收率，減少養殖環(huán)境臭氣、氨氣的產(chǎn)生，促進(jìn)動(dòng)物糞便恢復成形。

【適用對象】畜禽、各種特種養殖動(dòng)物、水產(chǎn)動(dòng)物

【產(chǎn)品成分分析保證值】枯草芽孢桿菌、乳酸片球菌、沼澤紅假單胞菌等等合計≥200億cfu/g，水分＜9.0%。凈重：500克/袋。

使用說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品功能與特點(diǎn)】

◆改善腸道內環(huán)境和微生態(tài)環(huán)境，抑制毒胺或氨的產(chǎn)生降低養殖欄舍中的臭味氨氣濃度；凋節動(dòng)物體內微生態(tài)平衡，對動(dòng)物腸道內有保健作用。

◆提高飼料效率，增強消化吸收，促進(jìn)生長(cháng)，提高飼料報酬，降低養殖成本，使用后動(dòng)物糞便的排泄量會(huì )減少，糞便逐漸恢復成形。

◆抗應激：能夠減少飼養動(dòng)物因環(huán)境條件劇變惡化而產(chǎn)生的應激，提高成活率。

◆凈化養殖環(huán)境，形成清潔養殖環(huán)境：排泄物中一樣保持有活菌，能夠在養殖環(huán)境中繼續繁殖，并自動(dòng)進(jìn)行發(fā)酵，抑制環(huán)境中病原菌的生長(cháng)，減少糞便的氨味、臭味、凈化環(huán)境，減輕污染。

◆能夠減輕或消除霉菌毒素對動(dòng)物的毒害作用，清除動(dòng)物體內藥物激素殘留，改善肉蛋品質(zhì)，恢復自然養殖風(fēng)味。

◆水產(chǎn)動(dòng)物飼料中使用本品后，能夠減緩水質(zhì)惡化或有助于水體有益微生物繁殖，改善水質(zhì)，對水產(chǎn)動(dòng)物腸道有保健功能。

【使用方法】

①養豬上的運用：種豬、母豬、肉豬每噸飼料中使用500克。

②家禽上的運用：肉禽蛋禽每噸飼料使用500克。

③兔子、牛、羊、馬等草食動(dòng)物、水產(chǎn)養殖上的運用：每噸精飼料中添加500克。

④各種特種養殖動(dòng)物上的運用：每噸飼料中添加1000克。

⑤飲水，每1000公斤清水加入本品200克，2小時(shí)后飲用。

⑥飼料廠(chǎng)生產(chǎn)全價(jià)飼料：每噸飼料中添加1000克（可以高溫制粒）。

【注意事項】

①飼喂動(dòng)物先溶于5倍以上的溫水中2小時(shí)后，再混合于飼料原料中效果更好；本產(chǎn)品采用多層包被和耐高溫菌種，高溫制粒對本產(chǎn)品稍有影響但不大，稍微加大使用量即可。

②使用過(guò)程中，動(dòng)物的免疫程序、衛生防疫照常進(jìn)行，大劑量在飼料中投喂抗生素時(shí)對效果有影響但可以繼續使用本品（部分益生菌和酶制劑會(huì )繼續產(chǎn)生效果），但不會(huì )產(chǎn)生副作用。

③周?chē)咔楦甙l(fā)期增加一倍的使用量。

【包裝規格】500g/包，40包/箱。