摘  要：肉雞壞死性腸炎(necrotic enteritis，NE)是產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens)導致的嚴重腸道疾病，每年給養(yǎng)禽業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。由于以前廣泛使用飼用抗生素，該病得到了有效的控制，然而，近年來由于耐藥性菌株的出現(xiàn)以及藥物殘留問題，世界各國相繼出臺了限制或禁用抗生素生長促進劑的監(jiān)管法規(guī)。隨著肉雞無抗生產(chǎn)模式的推行，該病的發(fā)病率已逐年提高，嚴重影響肉雞的生產(chǎn)，因而迫切需要找到能有效控制肉雞壞死性腸炎的抗生素替代方案。益生菌是能在腸道中存活并抑制病原菌過度繁殖的有益細菌，研究證實益生菌在控制肉雞壞死性腸炎方面確實有效，且生產(chǎn)成本相對低，故已成為控制肉雞壞死性腸炎的研究熱點。本文對近年來使用益生菌控制肉雞壞死性腸炎的相關(guān)研究進展進行了總結(jié)，以深入了解益生菌的作用機理，同時也為無抗時代的肉雞壞死性腸炎防控提供有益參考。

關(guān)鍵詞：肉雞；壞死性腸炎；產(chǎn)氣莢膜梭菌；益生菌

禽肉是人類重要的動物蛋白來源，肉雞養(yǎng)殖業(yè)已成為我國畜牧業(yè)中的一大支柱產(chǎn)業(yè)。肉雞健康是養(yǎng)殖者非常關(guān)注的問題，為控制疾病和促進肉雞的生長，抗生素被廣泛用作飼料添加劑。由于擔憂細菌產(chǎn)生耐藥性和抗生素在動物體內(nèi)殘留，尤其是近年來“超級耐藥菌”的出現(xiàn)，世界各國相繼出臺法規(guī)，禁止將抗生素生長促進劑用于肉用動物的生產(chǎn)。1997年，歐盟開始限制在動物飼料中使用某些抗生素，隨后在2006年統(tǒng)一禁止在動物飼料中使用所有抗生素(feed additives regulation 1831/2003/EC)。2012年和2013年，美國食品和藥品管理局頒布了“行業(yè)指南第209號和第213號”，建議肉用動物生產(chǎn)行業(yè)謹慎使用抗生素。我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部也于1999年發(fā)布了194號公告，宣布從2020年元旦開始全面禁止在飼料中添加抗生素。抗生素生長促進劑的禁用導致某些有經(jīng)濟學意義的重要疾病的發(fā)生率重新升高，肉雞壞死性腸炎(necrotic enteritis，NE)便是其中最重要的疾病之一。例如，法國的NE發(fā)生率從1995年的4％增至1999年的12.4％，給肉雞養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。因此，在無抗生產(chǎn)模式下，迫切需要找到能有效控制肉雞NE的抗生素替代方案。近年來，研究人員已經(jīng)對各種抗生素替代方案在防控疾病方面的效果進行了廣泛研究，包括疫苗、噬菌體、溶菌酶、植物提取物、精油、有機酸、益生菌等。益生菌能在動物的腸道中長期定植、存活、繁殖，會對腸道有害菌產(chǎn)生競爭性抑制和殺滅作用，可減少致病菌的數(shù)量和由此導致的腸道病變。研究人員已對此進行了廣泛的研究，期望將其作為一種抗生素替代方案(單獨或與其他聯(lián)合使用)，用于預(yù)防肉雞NE等疾病的發(fā)生。

1、益生菌的定義及其特點

益生菌是通過改善動物腸道內(nèi)的細菌平衡可提高宿主動物健康水平的一種活菌飼料添加劑。理想的益生菌需具備以下特點：(1)必須來源于宿主動物，且對宿主動物無害；(2)能耐受胃酸和膽汁的消化作用；(3)能在腸道中長時間存活并繁殖；(4)能黏附在腸上皮或黏液上；(5)可產(chǎn)生抑菌物質(zhì)；(5)能改變免疫反應(yīng)并調(diào)節(jié)腸道菌群活性[9]。

2、益生菌的作用機制

益生菌的作用機理包括：(1)通過調(diào)節(jié)宿主免疫系統(tǒng)并改變腸道中細菌的活性提高動物的免疫力；(2)通過存在于其細胞壁上的肽聚糖成分刺激動物免疫器官的發(fā)育；(3)通過競爭性排斥作用維持動物腸道中菌群平衡；(4)產(chǎn)生水解酶(如淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶等)；以幫助動物消化和吸收營養(yǎng)物；(5)降低細菌酶活性和氨產(chǎn)量，中和腸道毒素等；(6)產(chǎn)生短鏈脂肪酸(short-chain fatty acids，SCFAs；可降低腸道pH)和細菌素來抑制病原菌的生長與繁殖。

3、常見的益生菌類型及其對產(chǎn)氣莢膜梭菌的抑制效果

研究發(fā)現(xiàn)，許多益生菌菌株具有抗產(chǎn)氣莢膜梭菌的活性，如乳酸菌、腸球菌、桿菌和酵母等。每種益生菌可通過不同的作用模式抑制病原菌的生長及其毒性代謝物的產(chǎn)生，目前已經(jīng)有許多成熟的商用益生菌產(chǎn)品。常見益生菌對產(chǎn)氣莢膜梭菌抑制效果總結(jié)如下(表1)。

3.1 乳酸菌

某些乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)分離株具有益生特性，可用于預(yù)防動物和家禽上極其重要的疾病。天然LAB包括可在任何動物的腸道中分離到的乳桿菌、鏈球菌、腸球菌和乳球菌，這些LAB分離株可通過維持家禽腸道微生態(tài)菌群促進劑動物腸道健康。而且，還發(fā)現(xiàn)這些細菌具有抗炎和抑菌作用，因為其可分泌抗菌物質(zhì)，如細菌素等。LAB可以產(chǎn)生酸類物質(zhì)，如乳酸等，這些物質(zhì)可以降低腸腔中的pH，并防止產(chǎn)氣莢膜梭菌在腸道中繁殖。此外，益生性乳桿菌，如嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、羅伊乳桿菌(L. reuteri)和唾液乳桿菌(L. salivarius)，還能調(diào)節(jié)肉雞的免疫反應(yīng)，加速巨噬細胞的吞噬過程。Craven等認為，給肉雞投喂正常的腸道菌群，將減少產(chǎn)氣莢膜梭菌的定植，并降低NE的發(fā)生率。Hofacre等研究發(fā)現(xiàn)，給肉雞投喂乳酸菌時，NE所引發(fā)的病死率從60％降低至30％。

約氏乳桿菌(Lactobacillus Johnsonii)BS15是分離到的一株益生菌。在飼料中添加約氏乳桿菌BS15可提高肉雞的生長性能和肉品的營養(yǎng)價值，包括脂肪酸的組成，尤其是多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid，PUFA)的含量。此外，將約氏乳桿菌飼喂肉雞還可以控制脂肪沉積以及亞臨床型壞死性腸炎感染過程中的代謝。其他的益生性植物乳桿菌和羅伊乳桿菌菌株可改善動物腸道健康、增加腸絨毛高度和隱窩深度以及降低腸道黏度來提高體重。固態(tài)發(fā)酵的益生菌能提高飼料效率，這可以通過增加能量和蛋白駐留時間加以解釋。一個乳桿菌分離株(植物乳桿菌16)可提高外周淋巴細胞的增殖和腸黏膜中的γ-干擾素、白介素6(interleukin-6，IL-6)和IL-10表達水平，而另一個益生性菌株(命名為羅伊乳桿菌)則可提高健康家禽體內(nèi)的血清免疫球蛋白A(immunoglobulin A，IgA)、IgG和IgM的水平。綜上，添加植物乳桿菌和羅伊乳桿菌可通過提高血清IgG的水平和降低腸道感染相關(guān)性致病力對病原菌(如大腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌和腸道螺旋體等)所致疾病產(chǎn)生免疫應(yīng)答。除此以外，益生菌產(chǎn)生的分泌物與病原菌之間的相互作用在提高動物免疫力方面也起著關(guān)鍵作用，可使腸道結(jié)構(gòu)更加健康。

3.2 腸球菌

糞腸球菌是一種天然存在于動物和人體胃腸道中的細菌。腸球菌分離株具有抗產(chǎn)氣莢膜梭菌的特性，因為其通?？梢援a(chǎn)生抗菌物質(zhì)(即所謂的促腸活動素)和有機酸，可幫助家禽機體殺滅存在于胃腸道中的致病菌。歐洲食品安全局(EFSA)已經(jīng)批準將糞腸球菌菌株11181作為一種飼料添加劑，用于改善動物的生長性能。還有一項研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加糞腸球菌，可以增加宿主動物的腸絨毛表面積和改善腸道結(jié)構(gòu)，以幫助其吸收營養(yǎng)物質(zhì)，并最終提高動物的增重。這些益生菌還可調(diào)節(jié)動物腸道微生態(tài)菌群的構(gòu)成，并刺激腸道免疫反應(yīng)。有研究證實，糞腸球菌菌株對腸道病原菌有抵抗力，這些病原菌包括沙門桿菌、大腸桿菌、彎曲桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌。Morishita等發(fā)現(xiàn)，嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)和糞球菌(Streptococcus faecium)可使定植在動物空腸中的空腸彎桿菌減少27％。因此，在飼料中添加糞腸球菌，可以控制NE發(fā)病率和提高肉雞的健康狀況。

3.3 芽孢桿菌

芽孢桿菌屬細菌是一種具有益生特性的革蘭陽性菌。該屬細菌最重要的特點是能形成芽孢，具有抗逆性，能耐受顆粒料加工過程中的惡劣環(huán)境，因此適合大規(guī)模培養(yǎng)和工業(yè)化生產(chǎn)。在過去的數(shù)十年，國內(nèi)外有關(guān)科研人員對該屬細菌的研究主要集中在枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)和凝結(jié)芽孢桿菌(Bacillus coagulans)，具體情況見表1。

枯草芽孢桿菌是廣為人知的一種益生菌飼料添加劑，可以防止產(chǎn)氣莢膜梭菌的繁殖，提高動物的增重。經(jīng)口投喂枯草芽孢桿菌，可以調(diào)節(jié)肉雞的腸道健康和免疫力，La Ragione和Woodward發(fā)現(xiàn)，當使用109個枯草芽孢桿菌孢子接種1日齡和20日齡肉雞，然后在  24 h使用105 CFU產(chǎn)氣莢膜梭菌進行攻毒，產(chǎn)氣莢膜梭菌的定植和繁殖受到了抑制。在體外試驗中，枯草芽孢桿菌PB6(從健康雞腸道中分離的一株有益菌)可以產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，對多種梭菌、大腸桿菌和彎曲桿菌菌株具有抑菌活性。最重要的是，枯草芽孢桿菌PB6還能分泌具有抗菌、抗病毒和抗腫瘤特性的表面活性物質(zhì)，可以中和病原菌及其有毒代謝物。Jayaraman等發(fā)現(xiàn)，對試驗組和對照組肉雞攻毒艾美耳球蟲和產(chǎn)氣莢膜梭菌，隨后給它們分別飼喂添加和未添加枯草芽孢桿菌PB6的飼料，結(jié)果前者在飼料轉(zhuǎn)化率、NE腸道病變評分、產(chǎn)氣莢膜梭菌菌落數(shù)、腸絨毛高度與隱窩深度上均優(yōu)于后者的。綜上所述，益生性枯草芽孢桿菌PB6菌株可降低產(chǎn)氣莢膜梭菌所引發(fā)的肉雞NE的嚴重程度。

相關(guān)研究證實，地衣芽孢桿菌分離株H2是一種具有益生特性的有益菌，已被廣泛用于養(yǎng)禽業(yè)。拌入飼料的地衣芽孢桿菌可提高家禽的生長性能，可替代抗生素來控制商業(yè)性養(yǎng)禽場中的NE感染，且不會產(chǎn)生任何不良影響。此外，地衣芽孢桿菌還可產(chǎn)生多種水解酶，如蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等，從而提高肉雞對營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收。給肉雞預(yù)先投喂地衣芽孢桿菌，可以預(yù)防產(chǎn)氣莢膜梭菌的攻擊。發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌，可顯著提高15～35日齡肉雞的平均日增重，顯著降低料重比，提高感染產(chǎn)氣莢膜梭菌的肉雞的免疫器官指數(shù)，增強動物的免疫力，降低由產(chǎn)氣莢膜梭菌感染引發(fā)的腸道損傷程度，Wu等研究認為，在飼料中添加凝結(jié)芽孢桿菌，能有效預(yù)防肉雞的NE。

3.4 酵母

早在20世紀20年代，Henri Boulard首先發(fā)現(xiàn)，從荔枝果中分離出的某些酵母菌菌株(屬于酵母屬)具有益生的特性。酵母制品是天然的促生長劑。給肉雞口服布拉酵母(Saccharomyces boulardii)，可以改善腸道微生態(tài)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)腸道結(jié)構(gòu)，并提高細胞因子表達量，進而增強腸道黏膜抵御病原菌的能力。此外，布拉酵母還能提高動物的生長性能，并提高宿主的免疫力來抵御某些致病菌。同時，其還能提高營養(yǎng)因子的活性，如營養(yǎng)物質(zhì)的運輸?shù)?，并表現(xiàn)出抗炎特性。同樣，釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)也具有益生特性，對動物小腸后段中的致病菌有拮抗作用，這可能是由于其能產(chǎn)生乙醇所致。因此，在飼料中添加酵母可以抑制病原菌家禽腸道中的生長，并改善家禽的健康狀況。

4、結(jié)語

綜上所述，益生菌可以減少產(chǎn)氣莢膜梭菌在動物腸道中的生長、定植和毒素的產(chǎn)生，從而降低由產(chǎn)氣莢膜梭菌引發(fā)的腸道疾病的發(fā)生率。但是，其作用的有效成分、明確的作用機制等還有待進一步的深入研究。而且，本文提及的菌屬所涵蓋的所有菌株并非都具有防治產(chǎn)氣莢膜梭菌的效果。在菌株篩選過程中除了考察針對病原菌的抑菌效果外，還需要通過動物試驗驗證其有效性，特別是驗證在模擬實際應(yīng)用場景的實驗性感染中的效果，以確定其是否可作為一種有效的抗生素替代策略。

【主要作用】

1、節(jié)約飼料成本：本品在動物體內(nèi)大量繁殖代謝，產(chǎn)生大量的淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等，能促進動物對糖類、蛋白質(zhì)和脂肪的消化吸收，乳酸菌的分泌的乳酸等酸性物質(zhì)使腸道環(huán)境呈酸性，也有利于營養(yǎng)素的消化吸收，因此本品能提高雞群對飼料的消化吸收率，降低料耗，節(jié)約成本。

2、改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境：有效調(diào)節(jié)雞的腸道菌群平衡，明顯改善腸道微生態(tài)環(huán)境，抑制沙門氏菌、致病性大腸桿菌的生長和繁殖，從而降低糞便與養(yǎng)殖環(huán)境的氨氮味、臭味、異味，改善飼養(yǎng)環(huán)境。墊料中的致病菌量會明顯下降，能夠減少養(yǎng)殖環(huán)境及糞便中有機磷等有害物質(zhì)的含量，減少污染。連續(xù)使用本品后，養(yǎng)殖場遍布有益菌，形成益生菌生態(tài)養(yǎng)殖環(huán)境，糞污水道與儲水池能夠自動分解改善水質(zhì)，通過沼氣或多級儲水池過濾后結(jié)合如水生植物等措施能夠達到合格排放；

3、減少雞糞含水量，并消除雞糞產(chǎn)生的氨氮。清理出來的雞糞便能夠自動快速發(fā)酵（含水量低于70%，注意薄膜覆蓋密封）成生物菌肥，保護了生態(tài)環(huán)境。

4、保健效果明顯：本品中的以乳酸菌為主的益生菌，雞食用后能順利通過胃酸及膽汁的考驗，抵達腸道后能迅速增值，促進雞腸道有益菌落如雙歧桿菌、乳酸桿菌的生長，拮抗和抑制腸道內(nèi)有害菌增殖，糾正腸道菌群紊亂，使雞腸道菌群正?；?，對雞群腸道保健效果顯著。使用本產(chǎn)品后能夠明顯提高雛雞的成活率、減少腸道健康問題的發(fā)生，雞群健壯整齊，毛色光順漂亮。

5、增強飼料營養(yǎng)：本品在動物體內(nèi)能產(chǎn)生多種有益代謝產(chǎn)物如有機酸、維生素、氨基酸等，直接補充動物生長所需營養(yǎng)，提高產(chǎn)蛋率。

6、改善肉、蛋品質(zhì)：本品能加強飼料的適口性，降低血清膽固醇含量，減少肉蛋中的藥品殘留，改善雞肉和蛋品質(zhì)，減少破損率與壞蛋比例，長期使用蛋殼鮮亮光滑、肉蛋自然香醇，適合生產(chǎn)生態(tài)有機肉有機蛋。

7、節(jié)約抗生素等藥品開支：長期在飼料中使用本產(chǎn)品，由于保健效果明顯，可以減少或不使用抗生素，明顯減少藥品開支，提高雞群的成活率，讓養(yǎng)殖的雞肉、雞蛋更符合食品安全。

8、本品所用菌株穩(wěn)定性好，抗逆性強，具有耐熱、耐酸、耐膽汁、無污染、無任何違禁物質(zhì)、綠色環(huán)保的特點，可長期添加。

【用法用量】

飼養(yǎng)階段 用量（克/噸飼料）
雛雞 500；中雞 400
大雞 300；種雞蛋雞 400
淘汰蛋雞催肥 600-1000
飲水 100-200克/噸水

    開始使用請按照上述使用量的一倍連續(xù)使用一周，之后按照上述用量，能夠快速看到效果。

1、混料飼喂方法：直接混入全價顆粒飼料或自配粉料中，也可以將本品全部混合飼喂量10%的飼料中先飼喂，其他90%的料直接投喂即可?；?qū)⒈酒放c等重的紅糖、10-20倍低于45℃的溫水混合1小時以上，噴灑到飼料上簡單翻拌一下進行飼喂，效果更顯著。

2、飲水飼喂方法：最好是與本品等重紅糖一起溶解在飲水中一小時后再給雞飲用。飲水器具建議經(jīng)常清洗。

3、制粒方法：可以直接用于制粒，本品采用多層包埋技術(shù)，制粒中高溫會帶來部分損失，但只要加大20%的用量即可。

   【注意事項】

1、本產(chǎn)品無毒無害，飼料中預(yù)防和促長保健作用的抗生素不會影響使用效果，在大劑量抗生素治療期間可能造成效果下降，但無副作用；部分種雞蛋雞在開始使用益生菌產(chǎn)品拌料飼喂時可能出現(xiàn)輕度拉稀等，這是正常現(xiàn)象，是由于之前抗生素使用頻繁腸道紊亂，益生菌進入后需要幾天的“斗爭”期。

2、本品可以與防霉劑一起使用，還可以減少或代替防霉劑。開封后盡快用完，未用完需要扎口保存。 

3、如果出現(xiàn)使用本品效果不顯著請點擊這里閱讀——養(yǎng)殖使用微生物（益生菌）效果不明顯，可能是抗生素與化學消毒劑使用過量的因素

【規(guī)格】1000g×15袋/箱，市場售價約40元/包。

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