微生物發(fā)酵稻草的研究表明具有原料廣泛、生產(chǎn)成本低、經(jīng)濟(jì)效益高
摘要:研究了發(fā)酵稻草生產(chǎn)飼料蛋白的培養(yǎng)條件。在實(shí)驗(yàn)室條件下,培養(yǎng)基的基本組成為稻草80g,麩皮20g,(NH)2SO42g,葡萄糖2g,KH2P041g。 原料:水為1 3, pH515~610,接種量10%,培養(yǎng)溫度28 °C~30 °C, 培養(yǎng)周期10d。產(chǎn)物分析結(jié)果表明,粗蛋白含量達(dá)到2215 %,粗纖維量為2518 %。
關(guān)鍵詞: 糙皮側(cè)耳,康氏木霉,飼料蛋白,稻草,培養(yǎng)條件
木質(zhì)纖維素是植物秸稈的主要成分,是地球上數(shù)量最大的可再生性能源物質(zhì)。利用微生物可把木質(zhì)纖維材料轉(zhuǎn)化為飼料、化工原料等,具廣闊的應(yīng)用前景。但秸稈中,由于木質(zhì)素和纖維素成分緊密結(jié)合,木質(zhì)素將纖維素緊緊包裹在里面,從而給纖維性成分的利用造成困難。因此,目前對(duì)秸稈轉(zhuǎn)化的研究重點(diǎn)集中在如何消除木質(zhì)素對(duì)秸稈消化的抑制上中。一般來(lái)說(shuō),按常規(guī)的秸稈預(yù)處理的方法(高壓蒸汽處理、膨化、酸堿處理、氨化法等等)可以去掉50%左右的木質(zhì)素并使纖維素成為非結(jié)晶態(tài)而易于被利用[2]。但這些方法用于工業(yè)化生產(chǎn)時(shí)成本太高,且容易造成再次污染。對(duì)木質(zhì)素進(jìn)行最有效降解的微生物是白腐真菌,屬于擔(dān)子菌屬3]。在這類微生物中存在一種木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(Ligninperoxidase),正是這種酶對(duì)木質(zhì)素的降解起了關(guān)鍵的作用。另?yè)?jù)研究表明,用白腐真菌處理秸稈時(shí),秸稈不需進(jìn)行理化預(yù)處理4]。據(jù)此,我們以菌種,以二步固態(tài)發(fā)酵的形式,對(duì)發(fā)酵稻草生產(chǎn)飼料蛋白培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究,現(xiàn)報(bào)道如下。
1、材料與方法
111菌種
112培養(yǎng)基
11212液體培養(yǎng)基:平菇液體菌種培養(yǎng)基(g)一玉米粉 510, 葡萄糖015,蔗糖110,KH2PO4 0105。自然pH。1 X10'Pa 滅菌30min;麥芽汁培養(yǎng)基一8°BX 麥芽汁,自然pH。1 X10'Pa滅菌30min。
11213發(fā)酵培養(yǎng)基(g) 稻草粉8010,麩皮2010,(NH4)2SO4 210,葡萄糖210, pH515~
113培養(yǎng)方法
11311斜面菌種培養(yǎng):挑取孢子接種到斜面,28 °C恒溫培養(yǎng)72h。
11312液體菌種培養(yǎng):平菇液體菌種一用無(wú)菌吸管吸取5mL菌絲體懸浮液接入搖瓶,28 °C, 150r/ min振蕩培養(yǎng)3~5d。木霉液體菌種一斜面菌種 -活化→接種- -環(huán)至裝有.5mL麥芽汁的大試管中,28 °C、150r/ min搖床培養(yǎng)20~24h。
114發(fā)酵工藝
采用固體淺層二步發(fā)酵的方式。取250mL三角瓶,每瓶裝入發(fā)酵培養(yǎng)基10g ,1 X105 Pa滅菌20min,冷卻后以5 %接種量接入側(cè)耳液體菌種,28 °C恒溫靜止培養(yǎng)3~5c后,再以10 %接種量接入霉菌菌種,28 C繼續(xù)培養(yǎng)。發(fā)酵結(jié)束后,用烘箱對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行干燥,溫度控制在60 °C左右,2~3h。當(dāng)水分下降至12 %以下時(shí),即可出料。
115 測(cè)定方法
水分的測(cè)定,粗蛋白的測(cè)定,粗纖維的測(cè)定和粗脂肪的測(cè)定均見(jiàn)文獻(xiàn)6。
2、結(jié)果與分析.
211 營(yíng)養(yǎng)性因子對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物粗蛋白含量的影響
21111主要基質(zhì)的影響:設(shè)稻草粉麩皮分別為100 :0、90 :10、80 20、70 30、6040五種不同配比,分別秤入250mL三角瓶中,加入無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)液,使固液比1 3,滅菌冷卻后接種。測(cè)產(chǎn)物的含水量和粗蛋白量。實(shí)驗(yàn)表明,隨麩皮用量增加,發(fā)酵產(chǎn)物的粗蛋白含量逐漸遞增。從培養(yǎng)生長(zhǎng)情況看,發(fā)現(xiàn)隨麩皮用量增加,菌株生長(zhǎng)繁殖速度加快。因此,增加麩皮用量不僅可以縮短培養(yǎng)時(shí)間,而且能增加粗蛋白含量。但麩皮用量超過(guò)20%以后,粗蛋白的增加幅度減小,考慮到成本及實(shí)際應(yīng)用,確定固體發(fā)酵培養(yǎng)基中稻草:麩皮為82進(jìn)行以下的研究。.
21112無(wú)機(jī)氮源的影響:以麩皮與稻草粉為2 :8, 加入不同的無(wú)機(jī)氮源,分別是(NH4)2SO4、NH4C1、(NH)2HPO4、 NH4C0NH4、NaNO;、KNO3。使無(wú)機(jī)氮含量為210 % ,研究了不同無(wú)機(jī)氮源對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物粗蛋白含量的影響,對(duì)照為不加無(wú)機(jī)氮。結(jié)果表明,以(NH)2SO4 作無(wú)機(jī)氮源,產(chǎn)物的粗蛋白含量比其他5種氮源都高,NH4C和(NH) 2HPO4其次,以尿素或NaNO3、KNO3作氮源時(shí)粗蛋白含量低,菌株生長(zhǎng)差。這可能是由于菌株利用這些無(wú)機(jī)氮時(shí),使培養(yǎng)物終pH中性偏堿之故。
212正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基在稻草:麩皮為8 2,培養(yǎng)基固液比為1 3的條件下,利用L9 (3)正交表設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)(表1所示),考察了(NH)2SO4、 KH2PO4、 葡萄糖、通氣量對(duì)粗蛋白產(chǎn)量的影響。其中通氣量以紗布層數(shù)控制。
結(jié)果表明,(NH4)2SO4 的極差最大,其次是葡萄糖和KHPO4,通氣量的極差最小,說(shuō)明(NH4)2SO4 對(duì)粗蛋白產(chǎn)量的影響最大。為直觀地反映各因子對(duì)指標(biāo)的影響,作出因子和實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的關(guān)系如圖1。從圖1可看出,(NH4)2SO4極差最大,其圖形波動(dòng)也最大;通氣量極差最小,其圖形波動(dòng)最小。
各因素的主次順序?yàn)?主一→次A CB D。為進(jìn)一步考察各因素對(duì)指標(biāo)的影響,進(jìn)行了方差分析,見(jiàn)表2。從方差分析看,(NH)2SO4 在99 %的置信度下對(duì)指標(biāo)的影響高度顯著;葡萄糖在95 %的置信度下對(duì)指標(biāo)的影響顯著。此結(jié)果與極差值的直觀分析一致,因此最佳組合的培養(yǎng)基為: (NH4)2SO4 2%~3%、葡萄糖2%、KH2PO4 1 %。
213培養(yǎng)基含水量的影響
固體發(fā)酵時(shí),底物的含水量應(yīng)控制在一個(gè)理想的水平。底物中最佳固液比取決于底物的性質(zhì)、顆粒大小及底物的持水能力。我們?cè)囼?yàn)了固液比分別為110 :015、110 :110、110 :115、 110 210、110 310、110 410時(shí)對(duì)發(fā)酵蛋白產(chǎn)量的影響。
從結(jié)果看,木霉的生長(zhǎng)需較高的含水量。固液比為1 3 (含水量約為76%)時(shí),粗蛋白含量最高,但此后呈下降趨勢(shì)。因?yàn)榈孜锼诌^(guò)多時(shí),使內(nèi)部產(chǎn)生厭氧環(huán)境,不利于真菌的活動(dòng)。
214培養(yǎng)基起始pH的影響
培養(yǎng)基的起始pH用1NHAI和10%NaOH調(diào)節(jié),測(cè)試6種培養(yǎng)基酸堿度(pH510、515、610、 615、710、715)對(duì)粗蛋白產(chǎn)量的影響。
結(jié)果表明,培養(yǎng)基的起始pH515較適宜,此時(shí)產(chǎn)物粗蛋白含量達(dá)2315%;超過(guò)pH610將對(duì)菌種的生長(zhǎng)產(chǎn)生較大的影響,例如pH715時(shí),產(chǎn)物粗蛋白含量只有19 %。
215培養(yǎng)時(shí)間的影響
側(cè)耳菌絲長(zhǎng)滿1/2培養(yǎng)基時(shí),接種木霉菌種,在28 °C恒溫靜止培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:培養(yǎng)物在24h前基本沒(méi)有生長(zhǎng),在24~72h生長(zhǎng)迅速。在72h后生長(zhǎng)又趨緩。實(shí)驗(yàn)還表明,培養(yǎng)6d時(shí)產(chǎn)物的粗蛋白含量最高,達(dá)25101 %。繼續(xù)培養(yǎng)到7d以后,即使延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間,粗蛋白產(chǎn)物量也不再增加。因此,培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)控制在3~6d之內(nèi)。
216優(yōu)化條件下菌株發(fā)酵稻草試驗(yàn)及產(chǎn)物分析以二步固態(tài)發(fā)酵的方法試驗(yàn)了糙皮側(cè)耳和康氏木霉混杏菌料乘莊:最忱邳養(yǎng)條件下發(fā)酵稻草產(chǎn)粗蛋白的情況,并進(jìn)行了原料和產(chǎn)物豆丁
結(jié)論
通過(guò)發(fā)酵條件試驗(yàn),特別是發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化試驗(yàn),初步確定了菌株混合固體發(fā)酵稻草生產(chǎn)飼料蛋白的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基組分為稻草粉80g、麩皮20g、(NH4)2SO42g、 葡萄糖2g、KH2PO41g;原料冰=1 3, pH515~6l0,接種量10%,培養(yǎng)溫度28 °C~30 °C,培養(yǎng)周期10d。
本研究結(jié)果表明,選用優(yōu)良微生物菌種在優(yōu)化條件下混合固體發(fā)酵稻草生產(chǎn)飼料蛋白,具有原料廣泛、生產(chǎn)成本低、經(jīng)濟(jì)效益高和生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單等特點(diǎn),既能有效利用資源,又能治理環(huán)境污染,變廢為寶,因而有重要的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。
加強(qiáng)型EM菌青貯飼料專用發(fā)酵劑,真正的專業(yè)菌種更好的青貯飼料發(fā)酵劑,發(fā)酵成功率高速度快,香醇可口,牛羊喜吃,連豬雞都搶吃
本品是一種以高濃度乳酸菌(300億/g)為主要原料加強(qiáng)型的專業(yè)青貯飼料發(fā)酵劑產(chǎn)品,適用于所有規(guī)模反芻動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)使用,培養(yǎng)后可進(jìn)行噴霧添加到青貯、微貯飼料固料中。與自然發(fā)酵或市場(chǎng)上一般EM菌比較,是為數(shù)不多的添加青貯飼料專業(yè)菌種:產(chǎn)丙酸丙酸桿菌、布氏乳桿菌、副干酪乳桿菌等的產(chǎn)品,具有:
1.發(fā)酵速度快,青貯發(fā)酵不易失敗。
2.增加分解秸稈纖維能力,縮短發(fā)酵時(shí)間,提高消化吸收率;
3.增加特殊酶和增香甜菌種,能夠提高青貯料香甜度和營(yíng)養(yǎng);
4.具有抑制青貯料持續(xù)產(chǎn)酸生態(tài)菌群設(shè)計(jì),適口性佳;
5.使用成本低廉,1包發(fā)酵2-3噸青貯秸稈飼料;
6.使用本產(chǎn)品制作的青貯飼料和微貯飼料飼喂動(dòng)物后,養(yǎng)殖場(chǎng)臭味、氨氣味等大幅度降低;
7.動(dòng)物排泄糞便中會(huì)殘留大量益生菌,糞便能夠自然加快發(fā)酵速度,形成良好益生環(huán)境。
【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
大家都知道EM菌建議進(jìn)行青貯飼料,比自然發(fā)酵的飼料速度快,但水劑EM菌產(chǎn)品因無(wú)法長(zhǎng)時(shí)間保證復(fù)合酶制劑和乳酸菌等的活性而無(wú)法添加在產(chǎn)品中,因此發(fā)酵青貯、微貯飼料存在分解秸稈的纖維慢、存在持續(xù)產(chǎn)酸后期影響適口性等問(wèn)題。
本產(chǎn)品創(chuàng)新地采用固體EM菌設(shè)計(jì),更方便運(yùn)輸。未使用前菌種處于休眠狀態(tài),在水中激活后快速對(duì)數(shù)繁殖(30℃環(huán)境下24小時(shí)后每毫升含活菌總數(shù)≥100億cfu)產(chǎn)生發(fā)酵功能,因?yàn)榫哂锌焖俜纸饨斩挼睦w維能力發(fā)酵速度極快,發(fā)酵出來(lái)的青貯飼料不僅更香醇、營(yíng)養(yǎng)更豐富,且在密封狀態(tài)下可以保存1年以上不變質(zhì)。
牛羊等草食動(dòng)物對(duì)發(fā)酵出來(lái)的青貯飼料非常喜吃,由于發(fā)酵的料非常香醇,還可以直接飼喂母豬、雞、鴨、鵝等,實(shí)踐證明都非常愛(ài)吃和很好的飼養(yǎng)效果,節(jié)約很多的飼料。動(dòng)物食用后由于糞便中還存在大量的益生菌等,養(yǎng)殖場(chǎng)的臭味和氨氣等大大降低,糞便能夠自然快速發(fā)酵,形成生態(tài)養(yǎng)殖。
【用法用量】
將本產(chǎn)品1包(200克)與200克以上紅糖(數(shù)量越多效果越好,白糖、葡萄糖)溶于10-50公斤的水中(根據(jù)秸稈的含水量適當(dāng)增減,低溫季節(jié)建議用35℃左右的溫水),24小時(shí)以上再用水稀釋或者直接噴入2-3噸秸稈青貯料中(可以一邊填料一邊噴入),將秸稈填入發(fā)酵池或容器中,一定要壓實(shí)并采用至少雙層膜密封頂部和采料的側(cè)面,保證密封性。
一般24小時(shí)后就會(huì)明顯升溫,3天左右產(chǎn)生高溫,并有香醇的發(fā)酵味溢出,一般發(fā)酵20天以上才開(kāi)封使用 ,如果用于喂豬、雞、鴨、鵝等建議發(fā)酵30天以上才使用。每次取用青貯料后,都要再次密封。
由于本品中加入了特別的復(fù)合酶制劑,也可以對(duì)秸稈不需要鍘切,整條進(jìn)行青貯發(fā)酵,只要壓實(shí)密封即可。發(fā)酵時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng),達(dá)到株桿糜爛成微微泥狀即可使用。
運(yùn)用加強(qiáng)型EM菌青貯飼料發(fā)酵劑不鍘草青貯飼料現(xiàn)場(chǎng)
用于喂豬、雞、鴨、鵝等的青貯飼料,開(kāi)啟后要透氣一小時(shí)以上,以不超過(guò)30%的比例與其它飼料混合后飼喂 。
【包裝規(guī)格】200g /包,80包/箱,市場(chǎng)售價(jià)約15-20元/包。
【貯 存】陰涼、干燥保存,由于高含量微生物制劑需要豐富的培養(yǎng)輔料,本產(chǎn)品中附帶了高級(jí)微生物激活后開(kāi)口培養(yǎng)輔料,有可能會(huì)造成對(duì)產(chǎn)品的板結(jié),但不會(huì)影響使用效果,只要將本產(chǎn)品溶于水中后即可使用。
青貯飼料幾點(diǎn)核心操作提示:
1.堆的高度和寬度太小,發(fā)酵和保存都比較難,不易長(zhǎng)時(shí)間保存,建議每次發(fā)酵不低于3立方。
2.一定要壓實(shí),一邊噴入菌液一邊壓實(shí),底部溢出的水不要管它,讓其流走即可。
3.要至少采用2層薄膜覆蓋進(jìn)行密封,最底部邊緣要將薄膜往墊料底部插入,最大限度地保證起密封。
4.開(kāi)封使用后,每次取料后要將開(kāi)口處再次密封起來(lái),確保不變質(zhì)。
【保 質(zhì) 期】12個(gè)月(于通風(fēng)、陰涼、干燥處存放)
聯(lián)系地址:廣西南寧市安吉路35號(hào)A棟26號(hào)(南寧市飼料獸藥禽苗市場(chǎng)內(nèi))
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廣西助農(nóng)公司有著20余年的生物發(fā)酵飼料經(jīng)驗(yàn),能夠針對(duì)你的養(yǎng)殖場(chǎng)做出最適合的模式,我們的發(fā)酵技術(shù)不僅設(shè)施投資簡(jiǎn)單(僅需塑料袋或塑料容器等即可),且發(fā)酵成功率很高。最關(guān)鍵是制作出來(lái)的發(fā)酵飼料品質(zhì)比一般更好(得益于先進(jìn)的酶菌結(jié)合發(fā)酵劑與經(jīng)驗(yàn)總結(jié)),能夠?yàn)槟闵a(chǎn)出低成本、養(yǎng)殖環(huán)保無(wú)抗優(yōu)質(zhì)的動(dòng)物產(chǎn)品出來(lái),大量成功案例可以驗(yàn)證。提供上門服務(wù)(快速解決家禽養(yǎng)殖上的疾病、環(huán)保、肉品質(zhì)等問(wèn)題)。
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