菌酶協(xié)同發(fā)酵對大豆皮抗營養(yǎng)因子降解效果的表明具有產(chǎn)生多種有益活性成分和香味物質(zhì)，達到改善發(fā)酵料產(chǎn)品品質(zhì)從而提高動物的適口性
摘要：研究通過采用菌酶協(xié)同厭氧發(fā)酵技術(shù)發(fā)酵大豆皮，以期評估不同種堿性蛋白酶、不同發(fā)酵劑組合和不同發(fā)酵參數(shù)對大豆皮中抗營養(yǎng)因子降解效果的影響。
結(jié)果表明：1）用堿性蛋白酶 3 號對球蛋白和 β-伴大豆球蛋白降解效果優(yōu)于其他蛋白酶；
2）大豆皮中補充發(fā)酵劑組合 2并添加蛋白酶 3 號，對抗原蛋白的降解效果較優(yōu)，且能有效降低發(fā)酵體系 pH，提高乳酸含量，改善發(fā)酵品質(zhì)和適口性；
3）大豆皮中補充發(fā)酵劑組合 2，并添加 100 或 200 U/g 堿性蛋白酶 3 號，酶解體系含水量為45%以及酶解 48 h 或 72 h 時其對大豆皮抗原蛋白的降解效果相對較好，其抗原蛋白降解率達 80%以上。
綜上所述，在菌酶協(xié)同厭氧發(fā)酵模式下， 其發(fā)酵參數(shù)為加酶量100 U/g、酶解時間 48 h、含水量 45%，發(fā)酵溫度 30 ℃，并選用發(fā)酵劑組合 2 時，其對大豆皮發(fā)酵效果較優(yōu)，可有效消除其抗營養(yǎng)因子，改善發(fā)酵料品質(zhì)、適口性、減少染霉風險，且產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，可實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。
近年來，關(guān)于膳食纖維的研究與應用已成為國內(nèi)外研究的熱點。有研究表明， 膳食纖維組成對動物不同生長階段的營養(yǎng)作用表現(xiàn)不同，可解決仔豬腹瀉、母豬便秘等問題。但目前我國對富含膳食纖維的非常規(guī)飼料資源利用并不充分，其中就包括大豆皮。大豆皮主要由半纖維素和纖維素等組成，具有膳食纖維含量高，水分、霉菌毒素、木質(zhì)素含量低，可消化程度高，產(chǎn)量大等優(yōu)勢，其不溶性碳水化合物具有調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、改善腸道健康等作用。可見，大豆皮作為一種膳食纖維原料在動物生產(chǎn)中有很好的飼用價值。有報道稱，大豆皮對生長豬生長性能和養(yǎng)分表觀消化率無不良影響，并可減少其糞便中氨氣的排放量，還可降低飼料成本，開拓飼料資源；大豆皮可提高仔豬窩均初生重、窩均斷奶重、斷奶存活率，改善母豬繁殖性能。但由于大豆皮含有較多的抗營養(yǎng)因子，導致其在畜禽生產(chǎn)上的應用受到一定限制。因此，基于大豆皮的產(chǎn)量優(yōu)勢和使用優(yōu)勢，研究與開發(fā)利用豆皮資源新途徑，消除其抗營養(yǎng)因子及致敏性，提高其飼用價值具有重要意義。
目前，常用的消除大豆中抗原蛋白的處理方法主要有微生物發(fā)酵和蛋白酶酶解技術(shù)，前者是通過發(fā)酵使菌產(chǎn)生蛋白酶發(fā)揮作用；后者是利用蛋白酶制劑將抗原蛋白降解，消除其致敏性；但兩者均存在一定的弊端，如適口性差、質(zhì)量不穩(wěn)定或不易保存等問題。而菌酶協(xié)同發(fā)酵技術(shù)可彌補上述處理方法的不足，已成為現(xiàn)在發(fā)酵飼料的主流模式。筆者前期通過對酸性、中性和堿性蛋白酶進行體外酶解試驗發(fā)現(xiàn)，堿性蛋白酶酶解豆皮可顯著提高抗原蛋白降解率，消除抗原蛋白的致敏性。而植物乳桿菌在微生物體外發(fā)酵過程中可產(chǎn)生乳酸等多種活性物質(zhì)，且可降低腸道 pH，抑制腸道內(nèi)有害菌生長，使發(fā)酵料儲存時間延長；而釀酒酵母菌可產(chǎn)生酒精等，使發(fā)酵料氣味香醇，改善發(fā)酵料氣味。但目前關(guān)于菌酶協(xié)同發(fā)酵技術(shù)在大豆皮上的研究報道卻相對較少。因此，本研究采用菌酶協(xié)同發(fā)酵技術(shù)，通過體外酶解發(fā)酵試驗，評估不同堿性蛋白酶、不同發(fā)酵劑組合、不同發(fā)酵參數(shù)（加酶量、酶解時間、含水量等）對大豆皮抗原蛋白降解效果的影響，以提高大豆皮的營養(yǎng)價值和飼用價值，旨在為開發(fā)功能性膳食纖維發(fā)酵飼料提供參考。
1、材料與方法
1.1 試驗材料
試驗用豆皮；
試驗用酶制劑和試驗用菌。
試驗用酶制劑主要有堿性蛋白酶 1 號、堿性蛋白酶 2 號、堿性蛋白酶 3 號和堿性蛋白酶 4 號，其酶活力分別為 20 萬 U/g、5 萬 U/g、5 萬 U/g、20 萬 U/g；試驗用菌主要有枯草芽孢桿菌、植物乳酸菌、 釀酒酵母菌， 其接菌量分別為 1×108CFU/g、1×107CFU/g 和 1×105CFU/g；試驗用培養(yǎng)基包括 MRS 培養(yǎng)基、胰蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、氯化鈉、糖蜜和尿素等。
99多功能飼料發(fā)酵劑——高濃度乳酸菌為主的固態(tài)飼料發(fā)酵劑，更輕易成功、效果更好的生物飼料發(fā)酵劑，簡單好用的中草藥發(fā)酵劑_飼料發(fā)酵劑產(chǎn)品_
1.2 試驗儀器
Bio-rad 全自動酶標儀；
超速離心機；FOSS2300型全自動凱氏定氮儀；
pH 計；
恒溫振蕩器；
恒溫培養(yǎng)箱；
粉碎機；
過濾篩；
精密電子天平（精確到 0.0001 g）；
封口機；烘箱等。
1.3 試驗方法
1.3.1 發(fā)酵大豆皮相關(guān)指標測定
按照酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測試劑盒說明進行大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白含量的快速定量檢測及計算，該試劑盒由北京龍科方舟生物工程技術(shù)有限公司提供；按照 GB/T 6435—2014 的方法進行干物質(zhì)測定；用pH 計測定發(fā)酵豆皮 pH；采用生物傳感分析儀進行乳酸測定。
1.3.2 菌株活化
將實驗室保存的 3 種菌種按 1%體積分別接種于 MRS 培養(yǎng)基、PDA 培養(yǎng)基或 LB 培養(yǎng)基中，30 ℃或 37 ℃活化 21 h 后，按同樣的方式進行二次擴培，獲得枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌和釀酒酵母菌的菌液，備用。
1.3.3 菌酶協(xié)同發(fā)酵豆皮的制備
在菌酶協(xié)同發(fā)酵豆皮試驗中，將堿性蛋白酶、枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌或釀酒酵母菌菌液以及糖蜜和尿素按一定比例加入到一定量的蒸餾水中混勻，并全部轉(zhuǎn)移至裝有大豆皮的發(fā)酵呼吸袋內(nèi)，混勻后封口機封口進行發(fā)酵。其中，以加酶量200 U/g、酶解時間 72 h、含水量45%、發(fā)酵溫度30℃為試驗開始時的基礎(chǔ)參數(shù)，每個組均設(shè)3個重復，發(fā)酵結(jié)束后按照GB/T 14699.1—2005進行采樣，55 ℃烘干并粉碎， 過 60目篩，通過上述測定方法測定發(fā)酵前后豆皮中抗營養(yǎng)因子、乳酸或 pH 等指標，并對各指標進行計算，進而篩選較優(yōu)堿性蛋白酶種類、 發(fā)酵劑組合和菌酶協(xié)同發(fā)酵參數(shù)。后期試驗根據(jù)前期試驗所得結(jié)果進行相關(guān)單因素調(diào)整。
1.3.4 發(fā)酵用蛋白酶的篩選
大豆皮、糖蜜、尿素、植物乳桿菌和釀酒酵母菌菌液按100∶2∶0.5∶1∶0.01 比例添加并補充 200 U/g 的不同種蛋白酶（堿性蛋白酶 1 號、堿性蛋白酶 2 號、堿性蛋白酶 3 號和堿性蛋白酶 4 號）進行發(fā)酵，其他發(fā)酵條件同1.3.3。
1.3.5 不同發(fā)酵劑組合的篩選
將大豆皮、糖蜜、尿素、枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌或釀酒酵母菌菌液其中的兩種或多種按100∶2∶0.5∶1∶1∶0.01 比例添加，制成 4 種不同發(fā)酵劑組合，其中發(fā)酵劑組合 1 包括大豆皮、糖蜜、尿素、枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌或釀酒酵母菌；發(fā)酵劑組合 2 包括大豆皮、糖蜜、尿素、植物乳桿菌和釀酒酵母菌；發(fā)酵劑組合 3 包括大豆皮、枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌和釀酒酵母菌；發(fā)酵劑組合4 包括大豆皮、植物乳桿菌和釀酒酵母菌。每個發(fā)酵劑組合分別添加 50 U/g 和 100 U/g 兩個添加量的蛋白酶（根據(jù)1.3.4 試驗結(jié)果確定蛋白酶種類）進行發(fā)酵。其他發(fā)酵條件同 1.3.3。
1.3.6 菌酶協(xié)同發(fā)酵工藝優(yōu)化
單因素試驗涉及菌酶協(xié)同發(fā)酵豆皮所用堿性蛋白酶加酶量（50U/g、100U/g和200U/g），酶解時間（24h、48h和72h），含水量（40%、45%或50%）的篩選。根據(jù)上述篩選結(jié)果進行發(fā)酵參數(shù)優(yōu)化試驗，其他發(fā)酵條件同1.3.3。
1.4 試驗方法
試驗數(shù)據(jù)用 SPSS 18.0 軟件進行單因素方差分析（One-way ANOVA）和LSD 法多重比較，數(shù)據(jù)均以平均值±標準誤表示，P<0.05表示差異顯著。
2、結(jié)果與分析
2.1 不同蛋白酶發(fā)酵大豆皮對其抗原蛋白降解效果的影響
由表1可知，4種蛋白酶酶解大豆皮72h時，與其他3種酶相比，蛋白酶3 號對大豆皮中球蛋白降解效果顯著提高（P<0.05）；而與蛋白酶2號相比，蛋白酶3號對大豆皮中β-伴大豆球蛋白降解效果顯著提高（P<0.05），但與其他2種酶無顯著差異。這說明大豆皮中添加蛋白酶 3 號酶解大豆皮抗原蛋白效果較佳，后期試驗選擇蛋白酶 3 號進行菌酶協(xié)同發(fā)酵工藝優(yōu)化。
2.2 不同發(fā)酵劑組合發(fā)酵大豆皮對其抗原蛋白降解效果的影響
由表2可知，當在不同發(fā)酵劑組合中添加50 U/g或100 U/g蛋白酶 3 號，發(fā)酵劑組合2對大豆皮中球蛋白和β-伴球蛋白降解效果相對較佳，乳酸含量較高，pH相對較低。當在不同發(fā)酵劑組合中添加50 U/g蛋白酶 3 號，其中發(fā)酵劑組合2 中球蛋白和乳酸含量顯著高于發(fā)酵劑組合1、3或4（P<0.05）；當在不同發(fā)酵劑組合中添加100 U/g蛋白酶3號，其中發(fā)酵劑組合2中β-伴球蛋白降解率和乳酸含量顯著高于發(fā)酵劑組合1、3或4（P<0.05）。這說明大豆皮中補充組合為糖蜜、尿素、植物乳桿菌和釀酒酵母的發(fā)酵劑并添加蛋白酶 3 號進行菌酶協(xié)同發(fā)酵可達到很好的發(fā)酵效果。因此，后期試驗選用發(fā)酵劑組合2 進行菌酶協(xié)同發(fā)酵工藝優(yōu)化。
2.3 菌酶協(xié)同發(fā)酵工藝優(yōu)化
2.3.1 加酶量對大豆皮抗原蛋白降解效果的影響
由表3可知， 在補充發(fā)酵劑組合 2 的大豆皮體系中添加100 U/g和200 U/g 蛋白酶 3 號， 并發(fā)酵 48 h時，其對球蛋白和 β-伴大豆球蛋白降解效果顯著優(yōu)于其 50 U/g加酶量（P<0.05）；其中，當?shù)鞍酌?號加酶量為100 U/g和200 U/g 時，其球蛋白和β-伴大豆球蛋白降解率分別為81.98%和78.72%、85.18%和 80.79%，且兩者降解效果差異不顯著（P＞0.05）。因此，考慮成本問題，后期試驗將選用加酶量為100U/g堿性蛋白酶進行菌酶協(xié)同發(fā)酵工藝優(yōu)化。
2.3.2 發(fā)酵時間對大豆皮抗原蛋白降解效果的影響
由表4可知，通過測定不同發(fā)酵時間點大豆皮抗原蛋白含量發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵48 h 和 72 h 時大豆皮抗原蛋白降解率顯著高于發(fā)酵 24 h（P<0.05）；其發(fā)酵 48 h和72 h 時大豆皮球蛋白降解率分別為85.18%和87.06%，β-伴大豆球蛋白降解率分別為 80.63%和82.56%，且發(fā)酵 48 h 與發(fā)酵 72 h 時大豆皮抗原蛋白降解率變化不大， 因此選發(fā)酵大豆皮 48 h 進行后期試驗。
2.3.3 含水量對大豆皮抗原蛋白降解效果的影響
由表5可知，通過測定發(fā)酵大豆皮48h其抗原蛋白含量發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵體系含水量為45%時大豆皮抗原蛋白降解率顯著高于發(fā)酵體系含水量為40%和50%?？梢?，蛋白酶3號發(fā)酵大豆皮含水量為45%時，其發(fā)酵效果較優(yōu)。
3、討論
大豆皮中含有相當高水平的抗營養(yǎng)因子，尤其是球蛋白和β-伴球蛋白，其含量分別約為28 mg/g和52 mg/g。有報道稱，大豆中抗原蛋白具有很強的免疫原性，其可通過畜禽小腸上皮細胞的空隙進入血液和淋巴，使機體出現(xiàn)遲發(fā)型過敏反應，促使肥大細胞釋放組胺等有害物質(zhì)，引起腸道通透性增加以及腸道絨毛萎縮等，最終造成腸道損傷，影響營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，不利于畜禽生長。而菌酶協(xié)同的發(fā)酵技術(shù)可消除大豆皮中的多種抗營養(yǎng)因子，但其發(fā)酵效果受酶制劑種類和發(fā)酵體系pH等因素的影響。本試驗通過采用菌酶協(xié)同技術(shù)，對幾種堿性蛋白酶在大豆皮抗原蛋白降解效果進行評估，發(fā)現(xiàn)不同種堿性蛋白酶對抗原蛋白作用效果不同，堿性蛋白酶3號相比其他酶對大豆皮抗原蛋白的降解效果較佳。其原因可能是因為蛋白酶不總是降低其生物學致敏性，其對抗原蛋白的降解具有蛋白酶特異性，使其作用于大豆球蛋白和β-伴球蛋白各亞基或結(jié)構(gòu)，從而使其得以降解；也可能是因為蛋白酶在大豆皮發(fā)酵體系中的此 pH 條件下具有高酶活。有報道稱，堿性蛋白酶在堿性條件下對抗原蛋白具有較好的降解能力。又由于大豆皮營養(yǎng)成分比較單一，不利于微生物發(fā)酵。因此，本試驗接著通過在已添加一定量蛋白酶3號的大豆皮中補充不同發(fā)酵劑組合以調(diào)節(jié)發(fā)酵料 pH 并補充養(yǎng)分，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵劑組合為糖蜜、尿素、植物乳桿菌和釀酒酵母時，其發(fā)酵效果較好，有效降低了大豆皮抗原蛋白含量，促進了乳酸產(chǎn)生，并降低了發(fā)酵大豆皮 pH，提高了大豆皮發(fā)酵深度，改善發(fā)酵料氣味及其品質(zhì)和穩(wěn)定性。可見，菌酶協(xié)同發(fā)酵能夠有效地提高飼料品質(zhì)。這可能是因為在大豆皮中接入乳酸菌和酵母菌等有益菌進行發(fā)酵，可產(chǎn)生多種有益活性成分和香味物質(zhì)，達到改善發(fā)酵料產(chǎn)品品質(zhì)的目的。利用蛋白酶和植物乳桿菌發(fā)酵花生粕，可顯著降解大分子蛋白，提高必需氨基酸含量，改善了其品質(zhì)。
菌酶協(xié)同的發(fā)酵效果受酶制劑加酶量、酶解發(fā)酵時間和含水量等多種因素的影響。因此，本試驗對菌酶協(xié)同發(fā)酵大豆皮的工藝條件進行優(yōu)化。本試驗發(fā)現(xiàn)，不同劑量的蛋白酶3號對大豆皮中球蛋白和β-伴大豆球蛋白有不同程度的酶解效果，表現(xiàn)為隨著加酶量的增加其抗原蛋白降解率隨之增加。這可能是因為底物量一定，隨著酶添加量的不斷增加，酶與底物的結(jié)合效率也不斷增加，從而引起抗原蛋白降解率的增加。本試驗還發(fā)現(xiàn)添加100 U/g和200 U/g的蛋白酶3號對球蛋白和β-伴球蛋白降解效果差異不大，前者球蛋白和β-伴球蛋白降解率分別為81.98%和 78.72%，后者球蛋白和β-伴球蛋白降解率分別為85.18%和80.79%。這可能是因為當酶添加量過量時，酶分子趨于飽和，可能出現(xiàn)酶分子自身水解現(xiàn)象，造成酶對底物的作用減弱，對抗原蛋白的去除貢獻不大，這與前人的研究基本一致。另外發(fā)現(xiàn)，蛋白酶3號對大豆皮球蛋白的酶解效果相對較好。這可能是因為蛋白酶3號能破壞其中的二硫鍵， 作用于球蛋白各亞基更好地發(fā)揮降解作用?？梢?，菌酶協(xié)同的發(fā)酵技術(shù)確實是去除抗原蛋白的有效方法，考慮成本問題，選擇蛋白酶3號加酶量100 U/g為宜。
蛋白酶酶解效果受酶解時間的影響，為了使蛋白酶3號能在適宜的時間范圍內(nèi)發(fā)揮最大的酶解效率，我們對酶解時間進行了研究。本試驗發(fā)現(xiàn)不同酶解時間對抗原蛋白的降解程度不同，且隨著蛋白酶3號酶解時間的延長其抗原蛋白降解率隨之增加，但酶解超過48h以后，延長酶解時間對蛋白酶的酶解效率影響較小。這可能是因為是隨著酶解時間的延長，酶解底物濃度降低，酶反應速度逐漸下降，再加上酶解體系 pH 降到低于酶最適 pH，酶解反應將會受到抑制。大豆皮抗原蛋白的降解效果同時受含水量的影響。本試驗通過對發(fā)酵體系含水量進行研究發(fā)現(xiàn)，大豆皮中抗原蛋白的降解受含水量的影響顯著，且發(fā)酵體系含水量45%時其對抗原蛋白的降解效率較優(yōu)；并發(fā)現(xiàn)酶解效率隨含水量的增加呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。這可能是因為發(fā)酵體系含水量從50%降到45%過程中，有利于酶與底物結(jié)合，但當含水量從45%降到 40%時，酶解體系滲透液相應減少，導致酶解反應速率減緩。有報道稱，微生物發(fā)酵大豆皮可提高粗蛋白質(zhì)含量、降低粗纖維含量和脲酶活性，進而提高大豆皮的營養(yǎng)價值?？梢姡狙芯坷镁竻f(xié)同的發(fā)酵技術(shù)，通過對發(fā)酵參數(shù)和發(fā)酵體系pH等進行優(yōu)化，可將大豆皮中的球蛋白和β-伴球蛋白等抗營養(yǎng)因子有效去除，并可增加其適口性，提高大豆皮產(chǎn)品品質(zhì)及儲存穩(wěn)定性，以改善動物腸道健康，提高其飼用價值。
4、結(jié)論
在本試驗條件下，采用菌酶協(xié)同厭氧發(fā)酵模式，綜合考慮了抗原蛋白降解情況、發(fā)酵深度、產(chǎn)酸情況、發(fā)酵料氣味，以及發(fā)酵工藝成本等，最終確定的發(fā)酵劑組合為糖蜜、尿素、植物乳桿菌和釀酒酵母菌；工藝條件為：植物乳桿菌1%，釀酒酵母菌0.01%，加酶量為100 U/g，發(fā)酵時間為48h，含水量45%，發(fā)酵溫度為30℃時，其對大豆皮發(fā)酵效果較優(yōu)，可有效消除其抗營養(yǎng)因子，改善發(fā)酵料品質(zhì)、適口性、減少染霉風險，且產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，可拓寬大豆皮在動物飼糧中的應用，以實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。
實戰(zhàn)操作技術(shù)——棉菜籽餅脫毒變身優(yōu)質(zhì)飼料替代豆粕操作新技術(shù)
當前豆粕價格很高有些地方貨源緊缺，而棉菜籽餅（棉籽粕、菜籽粕）價格相對便宜，棉菜籽餅是棉子、油菜籽榨油后剩下的餅狀殘渣，蛋白質(zhì)含量較高，含有各種氨基酸成分。但由于棉菜籽餅中含有植酸、芥子堿等物質(zhì)，這些物質(zhì)含有一定的毒性，還會影響動物的消化吸收，不能大量使用，因此不建議直接飼喂給動物！
現(xiàn)在通過微生物飼料發(fā)酵劑的除毒脫毒技術(shù)，可以成功將菜籽餅變?yōu)閮?yōu)質(zhì)添加飼料，直接按照1公斤發(fā)酵的棉菜籽餅（發(fā)酵前的重量）代替約0.85公斤豆粕進行使用。飼料發(fā)酵劑中的有益微生物，在發(fā)酵過程中分泌的代謝產(chǎn)物，可將棉菜籽餅中的毒性物質(zhì)等有效分解。
豆粕、菜粕、棉粕成分對比
1.豆粕是一種高蛋白原料，無需脫毒即可用作飼料。其中蛋白質(zhì)含量為40%-48%，賴氨酸含量為2.5%-3.0%，色氨酸含量為0.6%-0.7%，蛋氨酸含量為0.5%-0.7%。2020年11月12日報價每噸在3500元左右。
2.菜粕的粗蛋白含量在34%-38%之間，特點是蛋氨酸含量高（僅次于芝麻餅、粕），賴氨酸含量亦高。而精氨酸含量低，是餅、粕飼料中含量最低的。菜籽粕的有效能值偏低（淀粉含量低、菜籽殼難以消化利用）。礦物質(zhì)中，鈣和磷的含量均高，硒和錳的含量亦高。特別是硒的含量是常用植物飼料中最高的。2020年11月12日報價每噸在2900元左右。
3.棉粕蛋白質(zhì)含量一般為44.32%，僅次于豆粕的蛋白質(zhì)含量48%，而高于菜籽粕的蛋白質(zhì)含量36.04%。精氨酸含量高達3.6%-3.8%，而賴氨酸含量僅有1.3%-l.5%，只有豆粕的一半。2020年11月12日報價每噸在3000元左右。
是否需要脫毒處理
1.豆粕無需經(jīng)過脫毒即可用作飼料。而且豆粕中富含蛋白質(zhì)和多種氨基酸，在不需要額外加入動物性蛋白的情況下，僅豆粕中含有的蛋白質(zhì)和氨基酸足以平衡家禽和豬的食譜，促進它們的營養(yǎng)吸收。只有當其他粕類單位蛋白成本遠低于豆粕時，豆粕才有可能被替代。
2.菜粕菜籽中含有硫葡萄糖苷、芥酸、單寧、皂角苷等不良成分，其中主要是硫葡萄糖苷。硫葡萄糖苷本身無毒，但在一定溫度和水分條件下，經(jīng)過菜籽本身含有的芥子酶的酶解作用而產(chǎn)生異硫氰酸酯、唑烷硫酮和腈類等有害物質(zhì)。這些物質(zhì)可引起甲狀腺腫大，從而造成動物生長速度下降，繁殖力減退。單寧則妨礙蛋白質(zhì)的消化，降低適口性。而芥酸阻撓脂肪代謝，造成心臟脂肪蓄積及生長受到抑制。。使用前需進行一定的脫毒處理，并且使用時要加以限制，具體喂量應根據(jù)菜粕中有害成分含量而定。經(jīng)過脫毒處理的菜籽粕喂量可以加大，而“雙低”油菜籽生產(chǎn)的菜粕喂量要受限制。同時，應結(jié)合菜粕的氨基酸組成特點，適當搭配其它餅粕。
3.棉籽中含有對動物有害的棉酚及環(huán)丙烯脂肪酸，尤其是棉酚的危害很大。在制油過程中，由于蒸炒，壓榨等熱作用，大部分棉酚與蛋白質(zhì)、氨基酸結(jié)合而變成結(jié)合棉酚，結(jié)合棉酚在動物消化道內(nèi)不被動物吸收，故毒性很小。另一部分棉酚則以游離形式存在于餅、粕及油品中，這部分游離棉酚對動物毒性較大，尤其單胃動物過量攝取或攝取時間較長，可導致生長遲緩、繁殖性能及生產(chǎn)性能下降，甚至導致死亡。幼小動物對棉酚的耐受能力更低。由于棉籽餅、粕中游離棉酚對動物有害，因此，在使用棉餅、粕時，要根據(jù)飼喂對象及餅粕中游離棉酚的含量加以限量。反芻家畜在有優(yōu)質(zhì)粗料及多汁青料的情況下，棉籽餅、粕的用量不受限制，不會造成中毒。對單胃動物要限制喂量，最好使用經(jīng)過脫毒處理的棉籽餅粕。同時，使用棉籽餅、粕配制飼糧要注意氨基酸平衡，尤其是棉籽餅、粕的賴氨酸含量低，且利用率差，應注意添加賴氨酸。
發(fā)酵操作技術(shù)
發(fā)酵棉菜籽餅其實也是一個脫毒技術(shù)，具體操作如下：
1.仔細檢查棉菜籽餅，剔除棉菜籽餅中嚴重變質(zhì)發(fā)霉的部分，輕度發(fā)霉的原料可以忽略，因為微生物發(fā)酵能夠脫霉。
2.將棉菜籽餅粉碎并添加適量的玉米粉淀粉類的能量飼料等，調(diào)節(jié)飼料營養(yǎng)比例。
3.每噸棉菜籽餅加入2公斤食鹽、玉米粉（其它淀粉、面粉次粉等也可以，或者粉碎的生紅薯300公斤也可以）100公斤、“99多功能飼料發(fā)酵劑”1包（500g/包，市場售價約25元，以高濃度乳酸菌、酵母菌、復合酶制劑的專業(yè)發(fā)酵劑）。
4.在混合物料中添加適量水分，使混合物料含水量保持在55%左右，以“手抓一把并緊握，無水滴落，松手后輕觸即散”為宜，一般上述配方中需要加入清水約500-600公斤。
5.發(fā)酵方式根據(jù)實際環(huán)境條件各異，在桶、缸、塑料袋等容器中發(fā)酵均可。
6.發(fā)酵時要盡可能排盡空氣進行密封發(fā)酵。如果使用的發(fā)酵容器有密封不嚴實的隱患，要在一開始就在其外層包裹一層塑料袋并扎緊。發(fā)酵過程中不能啟封。
7.發(fā)酵時間受環(huán)境溫度影響，通常夏季發(fā)酵2-3天，冬季發(fā)酵5-7天即可完成。發(fā)酵完成后，有較為強烈的酸香味，ph值在3-4。
規(guī)模運用混合發(fā)酵現(xiàn)場
塑料缸、飼料袋（有內(nèi)膜）均可做發(fā)酵飼料
采用池子發(fā)酵
發(fā)酵完成的棉菜粕飼喂動物技術(shù)
需要注意的是，發(fā)酵后的飼料酸度較低，不可以取代禽畜全部日糧。其他類發(fā)酵飼料同理。飼喂時根據(jù)不同情況，將發(fā)酵飼料按照一定比例添加到日糧中，發(fā)酵完成的棉菜粕為濕料，具體使用量每大概1.5-2公斤發(fā)酵棉菜粕（濕料）代替動物日糧配方中1公斤豆粕的使用量進行代替使用，與其它飼料混合后直接飼喂，由于棉菜籽粕蛋白較高，最高使用量不要超過禽畜日糧飼喂量的40%（濕料重量）。如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵飼料過酸適口性變差，可在飼喂前在陽光下曬1-2小時，或添加適量的碳酸氫鈉（小蘇打）即可改善。
發(fā)酵過程中與發(fā)酵后使用過程中，發(fā)酵的容器要一直保持密封狀態(tài)，可以長時間保存（一年左右）。
當前養(yǎng)殖業(yè)成本高居不下，而飼料成本是其中最高的，利用廉價原料發(fā)酵飼料（包括一些輕度發(fā)霉的粕類低價收回）是極佳解決辦法。通過微生物飼料發(fā)酵劑的發(fā)酵作用，可以將輕度霉變飼料變成優(yōu)質(zhì)飼料，將不易消化的物質(zhì)分解為可被畜禽吸收的小分子糖類、氨基酸等。同時發(fā)酵飼料中富含有益微生物、酶制劑、酸化劑等，可調(diào)節(jié)畜禽腸胃微生態(tài)環(huán)境并進一步提高飼料利用率。發(fā)酵飼料氣味清香，提高了飼料的適口性，加上發(fā)酵飼料中有大約4℃的酒度，能夠促進動物新陳代謝促進健康抵御疾病，是當前養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中重要的一環(huán)。
本技術(shù)也可以同樣發(fā)酵菜籽粕（餅）、棕櫚粕等，方法同上。
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2020年已全面禁抗，我們之前經(jīng)常在飼料中添加的抗生素進行促生長行為將是違法，否則面臨巨額罰單。如何既能夠促進動物生長又能夠形成無抗養(yǎng)殖呢？其實中草藥在促進畜禽養(yǎng)殖健康和生長、改善肉蛋奶品質(zhì)大有可為，特別是將中草藥發(fā)酵后效果提升4-28倍等好處，這個實施方案比你想象中效果更好，運用的沒有不被效果折服的，值得嘗試驗證
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