菌酶協(xié)同對犢牛生長性能、糞便微生物的研究表明可提高生長、乳酸菌數(shù)量和預(yù)防腹瀉
摘 要：試驗(yàn)旨在研究菌酶協(xié)同對荷斯坦?fàn)倥ＩL性能、糞便微生物和養(yǎng)分含量的影響。選擇1月齡荷斯坦?fàn)倥?0頭，按照隨機(jī)分配原則分為對照組（基礎(chǔ)TMR日糧）、微生物組（基礎(chǔ)TMR日糧+復(fù)方微生態(tài)制劑）、酶組（基礎(chǔ)TMR日糧+復(fù)方酶制劑）和微生物+酶組（基礎(chǔ)TMR日糧+復(fù)方微生態(tài)制劑+復(fù)方酶制劑），每個(gè)處理10頭犢牛，進(jìn)行30 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)。結(jié)果表明：①微生物+酶組的試驗(yàn)?zāi)┲睾推骄赵鲋仫@著高于酶組、微生物組和對照組（P＜0.05），而料重比顯著低于酶組、微生物組和對照組（P＜0.05）。②與對照組相比，微生物組、酶組和微生物+酶組的好氧菌和大腸桿菌總數(shù)均顯著降低（P＜0.05），而厭氧乳酸菌數(shù)顯著升高（P＜0.05）；微生物組的大腸桿菌總數(shù)和厭氧乳酸菌數(shù)又顯著低于微生物+酶組和酶組（P＜0.05）。③微生物+酶組鮮糞的粗蛋白（CP）、干糞的有機(jī)物（OM）、CP和碳水化合物（TCHO）含量均顯著低于對照組（P＜0.05）。綜上所述，菌酶協(xié)同作用可以降低奶犢牛的料重比，從而提高犢牛生長性能，且菌酶協(xié)同優(yōu)于單獨(dú)使用微生物制劑或酶制劑。
犢牛的營養(yǎng)供給不僅直接影響現(xiàn)階段的生長發(fā)育，還會(huì)間接影響其成年后的繁殖性能和產(chǎn)奶性能。犢牛斷奶后隨著固體飼料進(jìn)食量的增加，消化器官快速發(fā)育，胃腸道容積和表面積增加，各種消化酶分泌量增加，胃腸道微生物菌群數(shù)量增加、種類趨于穩(wěn)定。以上變化必將影響犢牛對食入飼糧各養(yǎng)分的消化能力。微生物飼料添加劑是采用農(nóng)業(yè)農(nóng)村部認(rèn)可的有益微生物經(jīng)發(fā)酵制成的人工培養(yǎng)菌群及其代謝產(chǎn)物，飼喂消化道發(fā)育尚不完善的犢牛，可激發(fā)犢牛自身有益菌種繁殖增長，有效抵制有害菌系的生長，提高犢牛機(jī)體免疫力和飼料利用率，預(yù)防和治療一些消化道疾病，有效減少有害氣體排放。飼料酶制劑通過補(bǔ)充犢牛內(nèi)源消化酶的不足，有效降解飼糧中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，從而達(dá)到調(diào)節(jié)穩(wěn)定犢牛腸道微生物菌群、提高犢牛免疫力和飼料營養(yǎng)價(jià)值等功效。菌酶協(xié)同發(fā)酵飼料的效果往往會(huì)優(yōu)于單獨(dú)使用微生態(tài)制劑或酶制劑。但復(fù)方微生態(tài)制劑（酵母菌和枯草芽孢桿菌）和復(fù)方酶制劑（木聚糖酶、纖維素酶和葡聚糖酶）協(xié)同對荷斯坦?fàn)倥５纳L性能、糞便微生物和養(yǎng)分含量的影響尚未見報(bào)道。本研究選擇斷奶后荷斯坦?fàn)倥檠芯繉ο?，探討單一的?fù)方微生態(tài)制劑/復(fù)方酶制劑或者菌酶協(xié)同對荷斯坦?fàn)倥ＩL性能、糞便微生物和養(yǎng)分含量的影響，以期為犢牛實(shí)際生產(chǎn)提供理論依據(jù)。
1、材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
牛羊養(yǎng)殖專用復(fù)合益生菌
【產(chǎn)品成分分析保證值】枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、乳酸菌（糞腸球菌、屎腸球菌）、丁酸梭菌、植物乳桿菌等，每克≥200億cfu/g。水分＜9.0%
凈含量：1000g
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
選擇1月齡荷斯坦?fàn)倥?0頭，隨機(jī)分成4個(gè)處理，每個(gè)處理10頭。對照組飼喂基礎(chǔ)TMR日糧（見表1）；微生物組在基礎(chǔ)TMR日糧中添加微生態(tài)制劑（250 g/kg）；酶組在基礎(chǔ)TMR日糧中添加酶制劑（250 g/kg）；微生物+酶組在基礎(chǔ)TMR日糧中同時(shí)添加微生態(tài)制劑（250 g/kg）和酶制劑（250 g/kg）。進(jìn)行30 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)。
注：1.預(yù)混料為每千克日糧提供：Ca 1.8 g、P 1.6 g、VA 2 200 IU、VD 300 IU、VE 25 IU、Fe 50 mg、Co 0.1 mg、Cu 10 mg、Zn 40 mg、I 0.25 mg、Se 0.3 mg；
2、營養(yǎng)水平中凈能為計(jì)算值，其余為實(shí)測值。
1.3 測定指標(biāo)
生長性能：每天記錄采食量，試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)對試驗(yàn)牛進(jìn)行稱重，計(jì)算料重比。
糞便營養(yǎng)成分：干物質(zhì)（DM）、粗灰分（CA）、有機(jī)物（OM）、粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE）含量和總能（GE）的測定參考AOAC（2012）和國標(biāo)的方法進(jìn)行。DM含量采用（103±2）℃烘干法（GB/T 6435—2006）測定，CP含量采用半微量凱氏定氮法（GB/T 6432—1994）測定，EE含量采用索氏乙醚提取法（GB/T 6433—2006）測定，OM含量采用550℃灰化法（GB/T 6438—2007）測定。碳水化合物（TCHO）和GE按照以下公式計(jì)算。
OM（%）=DM（%）-CA（%）
TCHO（%）=DM（%）-CP（%）-EE（%）
GE(MJ/kg)=（5.6×CP+4.2×TCHO+9.4×EE）×4.18/1000
糞便微生物：在試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天的晨飼前直腸取糞樣，放入已滅菌的4 mL離心管中，并將裝有樣品的離心管放入裝有冰袋的泡沫箱中保存（離心管不能直接接觸冰袋，應(yīng)在離心管和冰袋之間加一個(gè)紙擋板），用于測定微生物群落。采用細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)法測定好氧菌、大腸桿菌、厭氧乳酸菌和沙門氏菌的數(shù)量。
按常規(guī)方法配制好氧菌培養(yǎng)基、大腸桿菌培養(yǎng)基（麥康凱瓊脂培養(yǎng)基）、乳酸菌培養(yǎng)基（MRS瓊脂培養(yǎng)基）和沙門氏菌培養(yǎng)基（HE瓊脂培養(yǎng)基）。將各培養(yǎng)基121℃滅菌15 min，倒入直徑90 mm的培養(yǎng)皿中，好氧菌培養(yǎng)基厚度4 mm，厭氧菌培養(yǎng)基與皿口相平。細(xì)菌數(shù)量通過平板菌落計(jì)數(shù)法用肉眼觀察菌落個(gè)數(shù)。
平板菌落計(jì)數(shù)法：
①滅菌：培養(yǎng)皿和槍頭放入高壓蒸汽鍋中滅菌。
②編號：取無菌培養(yǎng)基若干，分別用標(biāo)簽紙標(biāo)記培養(yǎng)皿10-4、10-5、10-6、10-7、10-8和10-9各3份。
③稀釋：取1.0 g糞樣加入9 mL生理鹽水,充分振蕩使糞樣在無菌生理鹽水中分布均勻，取混懸液做系列稀釋，依次稀釋。
④取樣，分別用移液槍吸取10-4、10- 5、10-6、10-7、10-8和10-9稀釋液各0.2 mL，加入相應(yīng)的培養(yǎng)皿中間。
⑤倒平板：分別向盛有不同稀釋度菌液的培養(yǎng)基中倒入冷卻至45℃左右的選擇培養(yǎng)基，搖勻，37℃培養(yǎng)48 h。
⑥計(jì)數(shù)：計(jì)算同一稀釋度3個(gè)平板中的菌落平均數(shù)，根據(jù)稀釋倍數(shù)計(jì)算出每克糞便中所含的菌數(shù)（用對數(shù)lg CFU/g表示）。
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與方法
試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理采用SAS 9.4軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，各處理組間差異采用單因子方差（one-way ANOVA）分析，用TuKey多組極差檢驗(yàn)法進(jìn)行多重比較，顯著性水平P＜0.05。
2、結(jié)果與分析
2.1 菌酶協(xié)同對犢牛生長性能的影響（見表2）
生長性能方差分析表明，微生物+酶組的試驗(yàn)?zāi)┲睾推骄赵鲋仫@著高于酶組、微生物組和對照組（P＜0.05），而料重比顯著低于酶組、微生物組和對照組（P＜0.05）。酶組和微生物組的試驗(yàn)?zāi)┲睾推骄赵鲋仫@著高于對照組（P＜0.05），而料重比顯著低于對照組（P＜0.05）。酶組的料重比顯著低于微生物組（P＜0.05），其他均差異不顯著（P＞0.05）。
2.2 菌酶協(xié)同對犢牛糞便微生物的影響（見表3）
2.3 菌酶協(xié)同對犢牛糞便鮮樣基礎(chǔ)上養(yǎng)分含量的影響（見表4）
方差分析表明，微生物+酶組和酶組鮮糞的CP含量顯著低于對照組（P＜0.05），其他均差異不顯著（P＞0.05）。
2.4 菌酶協(xié)同對犢牛糞便DM基礎(chǔ)上養(yǎng)分含量的影響（見表5）
方差分析表明，微生物+酶組的OM、CP含量和TCHO含量顯著低于對照組（P＜0.05）。微生物組、酶組的TCHO含量顯著低于對照組（P＜0.05），其他均差異不顯著（P＞0.05）。
3、討論
3.1 菌酶協(xié)同對犢牛生長性能的影響
犢牛的平均日增重、平均日采食量和料重比是反映犢牛生長性能最直觀的指標(biāo)。犢牛等幼齡反芻動(dòng)物的消化系統(tǒng)不完善，消化道所分泌的消化酶的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足需要，犢牛主要依賴皺胃和小腸來消化牛奶和日糧，其消化特征與單胃動(dòng)物類似。30日齡左右的西雜母犢牛日糧中添加復(fù)合酶制劑（纖維酶、木聚糖酶、果膠酶、葡萄糖和淀粉酶）顯著提高日增重。復(fù)合酶制劑（木聚糖酶、β-葡聚糖酶、β-甘露糖酶、纖維素酶、果膠酶和中性蛋白酶）對70日齡左右的斷奶西門塔爾公犢牛的平均日采食量沒有顯著影響，但200 g/t添加量組的平均日增重顯著高于對照組，可能是酶制劑提高了日糧中的非淀粉多糖的分解，促進(jìn)了犢牛對日糧的消化和吸收，從而使?fàn)倥５娜赵鲋厣仙?。犢牛胃腸道內(nèi)微生物種類和數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于成年牛，不能依賴胃腸道內(nèi)的微生物來消化食糜。地衣芽孢桿菌顯著提高新生荷斯坦?fàn)倥５钠骄赵鲋兀珜ζ骄詹墒沉烤鶡o顯著影響。但是復(fù)合菌（植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌）及益生元（植物乳桿菌、枯草芽孢桿菌和低聚果糖）均沒有顯著改善3日齡荷斯坦母犢牛的平均日采食量和平均日增重。微生態(tài)和酶制劑聯(lián)合添加對犢牛生長性能的研究較少。研究表明，1 kg/t復(fù)合酶和20 g/t乳酸菌制劑制作的青貯鮮食玉米秸稈顯著提高11月齡海南黑牛的試驗(yàn)?zāi)┲睾推骄赵鲋?。研究證實(shí)，微生態(tài)制劑和纖維素復(fù)合酶制劑顯著改善250 kg左右西門塔爾架子牛的生長性能。本試驗(yàn)中，微生態(tài)制劑（酵母菌和枯草芽孢桿菌）和復(fù)方酶制劑（木聚糖酶、纖維素酶、葡聚糖酶）聯(lián)合使用顯著提高犢牛的平均日增重和試驗(yàn)?zāi)┲?，而料重比則顯著降低，表明菌酶協(xié)同效果顯著優(yōu)于單獨(dú)使用酶制劑或微生物添加劑，顯著提高犢牛的生長性能。
3.2 菌酶協(xié)同對犢牛糞便微生物含量的影響
犢牛糞便中的大腸桿菌、厭氧乳酸菌、好氧菌和沙門氏菌含量是反映犢牛腸道健康狀況的重要指標(biāo)。有研究表明，當(dāng)腸道內(nèi)大腸桿菌數(shù)量超過乳桿菌的2～5倍時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)犢牛消化功能障礙或抵抗力下降的情況，進(jìn)而引發(fā)疾病。尚未見菌酶協(xié)同影響犢牛糞便微生物含量的文獻(xiàn)報(bào)道。0.2%復(fù)合酶制劑（β-葡聚糖酶、木聚糖酶和纖維素酶）的早秈稻型飼糧顯著降低體重約35 kg的“長加”二元雜交豬糞便中的大腸桿菌數(shù)量。研究表明，酵母菌（布拉氏酵母菌）降低新生荷斯坦?fàn)倥＜S便中大腸桿菌的數(shù)量，提高乳酸菌數(shù)量。給30日齡左右的海福特牛和日本黑牛雜交一代犢牛的基礎(chǔ)飼糧中添加丁酸梭菌（4 g/d和8 g/d），糞便中丁酸梭菌數(shù)量分別提高了5.3倍和7.4倍，大腸桿菌較對照組顯著降低，8 g/d組沙門氏菌數(shù)量顯著低于對照組。研究發(fā)現(xiàn)，菌酶協(xié)同[1 g/kg植物乳桿菌+1 g/kg復(fù)合酶（β-葡聚糖酶、β-木聚糖酶、β-甘露糖酶和蛋白酶）]使斷奶仔豬糞便中乳酸菌數(shù)量和乳酸菌/大腸桿菌比值有增加趨勢，大腸桿菌數(shù)量有降低趨勢。復(fù)合酵母培養(yǎng)物（5 g/kg）和菌酶協(xié)同（5 g/kg復(fù)合酵母培養(yǎng)物+0.3 g/kg木瓜蛋白酶）處理的斷奶仔豬糞便乳酸菌數(shù)量和乳酸菌/大腸桿菌值顯著高于對照組，大腸桿菌數(shù)量顯著低于對照組。本試驗(yàn)中，微生態(tài)制劑（酵母菌和枯草芽孢桿菌）組犢牛糞便中的大腸桿菌最低，菌（酵母菌和枯草芽孢桿菌）酶（木聚糖酶、纖維素酶、葡聚糖酶）協(xié)同作用對好氧菌和厭氧乳酸菌的效果最明顯。綜上所述，菌酶協(xié)同降低犢牛糞便好氧菌和大腸桿菌總數(shù)，提高厭氧乳酸菌數(shù)量，對于犢牛腹瀉具有一定的預(yù)防作用。
3.3 菌酶協(xié)同對犢牛糞便養(yǎng)分含量的影響
牛糞中各養(yǎng)分的含量受日糧組成、營養(yǎng)水平、牛品種、牛本身對飼料的消化情況、飼料品質(zhì)以及飼料的加工程度等多因素的影響。研究表明，復(fù)合酶（淀粉酶和胃蛋白酶）顯著提高35～60日齡犢牛對OM、淀粉和CP的表觀消化率。地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和米曲菌的復(fù)合酶制劑（3 g/kg）顯著提高4～6月齡荷斯坦?fàn)倥︻w粒TMR日糧的CP、酸性洗滌纖維的表觀消化率。微生態(tài)和酶制劑聯(lián)合添加對犢牛表觀消化率的研究較少。菌酶協(xié)同（0.25%復(fù)合酶制劑+0.25%芽孢桿菌類微生態(tài)制劑）顯著提高斷奶仔豬能量、CP和粗纖維的表觀消化率。本試驗(yàn)中，菌酶協(xié)同作用顯著降低鮮糞中CP和干糞的OM、CP、TCHO含量，說明菌酶協(xié)同能夠促進(jìn)奶犢牛對飼料OM、CP和TCHO的吸收和利用。但是菌酶協(xié)同對犢牛養(yǎng)分消化率的影響需要代謝試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)。
4、結(jié)論
本試驗(yàn)條件下，菌酶協(xié)同作用可以降低奶犢牛的料重比，降低犢牛鮮糞的CP含量和干糞的OM、CP和TCHO含量，從而提高犢牛生長性能，且對于糞便微生物的影響優(yōu)于單獨(dú)使用微生物制劑或酶制劑。
牛羊養(yǎng)殖專用復(fù)合益生菌——生態(tài)健康牛羊養(yǎng)殖專業(yè)益生微生物制劑產(chǎn)品，改善養(yǎng)殖環(huán)境臭味，減少發(fā)病率，提高肉品質(zhì)
降低牛羊養(yǎng)殖場臭味、氨氣、蒼蠅密度；降低料耗、提升腸道健康水平，促進(jìn)消化緩解和降低脹氣發(fā)生；連續(xù)使用能夠形成益生菌生態(tài)養(yǎng)殖環(huán)境。本產(chǎn)品在2021年11月再次升級，且完全針對反芻動(dòng)物腸胃特征而設(shè)計(jì)，比一般常規(guī)益生菌效果更直觀。
【產(chǎn)品成分分析保證值】枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、乳酸菌（糞腸球菌、屎腸球菌）、丁酸梭菌、植物乳桿菌等，每克≥200億cfu/g。水分＜9.0%
凈含量：1000g
【產(chǎn)品特點(diǎn)】
本品含有大量的乳酸菌、芽孢桿菌等益生菌?？筛纳品雌c動(dòng)物胃腸環(huán)境，抑制有害菌生長，并且有效分解飼料中的粗纖維等抗?fàn)I養(yǎng)因子，釋放營養(yǎng)物質(zhì)，使其能被充分消化吸收，提高飼料的利用率，提高健康指數(shù)，改善反芻動(dòng)物的生產(chǎn)性能，提高肉、奶品質(zhì)。并能夠改善養(yǎng)殖環(huán)境，建立生態(tài)健康養(yǎng)殖模式。
【性狀】
灰白色或淡黃色粉末。
【適用范圍】
牛、羊、鹿等反芻動(dòng)物使用。
【主要功效】
1.提高飼料利用率，促進(jìn)粗飼料的消化吸收，降低料肉比。
2.提高牛羊的產(chǎn)奶量，改善產(chǎn)乳的品質(zhì)，提高肉用牲畜的日增重，提升肉的品質(zhì)。適合有機(jī)奶產(chǎn)品、有機(jī)肉產(chǎn)品的生產(chǎn)。
3.改善瘤胃和腸道功能，減少牛羊等反芻動(dòng)物消化道健康問題的發(fā)生，降低和緩解反芻動(dòng)物脹氣發(fā)生。
4.糞便成形，降低糞臭，顯著減少養(yǎng)殖場的氨臭味，改善養(yǎng)殖場所生態(tài)環(huán)境。
5.增強(qiáng)牛羊等反芻動(dòng)物的免疫功能，提高反芻動(dòng)物的抗應(yīng)激能力。
6.連續(xù)使用本品后，養(yǎng)殖場臭味、氨氣等大幅度下降，形成益生菌生態(tài)養(yǎng)殖環(huán)境，糞污水道與儲(chǔ)水池能夠自動(dòng)分解改善水質(zhì)，牛羊糞便容易發(fā)酵等優(yōu)勢。
本品所用菌株具有穩(wěn)定性，抗逆性，具有耐熱、耐酸、耐膽汁，通過消化道不失活，無污染、無任何違禁物質(zhì)、綠色環(huán)保的特點(diǎn)，可長期添加。
【用法用量】
1.拌料：本品1kg配精料日糧的1000-1500公斤，先用精料日糧與本品充分混勻，再與其他草料混合后飼喂。
2.飲水：每1kg本品泡水100公斤（水溫不超過40℃，加入0.5公斤紅糖與1公斤淀粉效果更佳），攪勻后靜置12小時(shí)以上，取上層液體1公斤倒入500-1000公斤的牛羊飲水中直接飲水。沉淀物（載體）可以拌在料中，勿將沉淀加入飲水設(shè)施中，以免堵塞。
初次使用的前5天用量加倍，應(yīng)激期、病后恢復(fù)期添加量加倍。
【注意事項(xiàng)】
1.本產(chǎn)品無毒無害，飼料中預(yù)防和促長保健作用的抗生素不會(huì)影響使用效果，在大劑量抗生素治療期間可能造成效果下降，但無副作用。
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