摘要：試驗旨在研究發(fā)酵飼料對生長育肥豬生長性能與免疫力的影響。選取100頭健康、體重（23.21士2.13）kg生長育肥豬（公、母各半），隨機(jī)分為2組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)10頭豬。對照組為基礎(chǔ)日糧，試驗組為90%基礎(chǔ)日糧+10%乳酸菌發(fā)酵飼料。試驗期30天。結(jié)果顯示，試驗組生長育肥豬的末重、平均日增重、平均日采食量均顯著高于對照組（P<0.05），料重比顯著低于對照組(P<0.05)試驗組生長育肥豬的粗蛋白、能量、干物質(zhì)、粗纖維、粗脂肪表觀消化率均顯著高于對照組(P<0.05)。試驗組生長育肥豬血清總蛋白（TP）、球蛋白(GLB)含量顯著高于對照組(P<0.05)，尿素氮(BUN)、膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)，葡萄糖（GLU）含量以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性顯著低于對照組(P<0.05)。與對照組相比，試驗組生長育肥豬血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)含量顯著升高(P<0.05)，白細(xì)胞介素-1β（1L-1β）、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量顯著降低(P<0.05)；總杭氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶(SOD)活性顯著升高(P<0.05)，結(jié)合珠蛋白(HP)、丙二醛(MDA)含量顯著降低(P<0.05)。研究表明，發(fā)酵飼料可有效提高生長育肥豬的生長性能，增強(qiáng)機(jī)體蛋白質(zhì)、脂肪合成與代謝能力，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能。

乳酸菌繁殖代謝的過程中會產(chǎn)生多種有機(jī)酸、酶、多糖等物質(zhì)，有效降低禽畜飼料pH值，提高禽畜飼料的營養(yǎng)價值。研究發(fā)現(xiàn)，使用乳酸菌發(fā)酵禽畜飼料可有效降解禽畜飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子，調(diào)節(jié)腸道菌群，提高機(jī)體對飼料營養(yǎng)成分的吸收率，提高禽畜的免疫水平。研究發(fā)現(xiàn)，乳酸菌發(fā)酵飼料對增強(qiáng)禽畜的生長性能具有顯著效果。副干酪乳酸桿菌作為乳酸桿菌中的主要分支之一，其產(chǎn)酸、耐酸、抑菌等能力較強(qiáng)，能夠提高仔豬的生長性能，改善機(jī)體的免疫力。本研究以副干酪乳酸桿菌發(fā)酵飼料，研究乳酸菌發(fā)酵飼料對生長育肥豬的生長性能與免疫力的影響，為乳酸菌固態(tài)發(fā)酵飼料的應(yīng)用提供參考。

1、材料與方法

1.1試驗菌種

乳酸菌制劑為前期分離的副干酪乳酸桿菌菌株，活菌數(shù)為4×1010CFU/g。

1.2試驗日糧

試驗所用基礎(chǔ)日糧根據(jù)NRC(2012)20~50kg豬生長所需營養(yǎng)配制。以基礎(chǔ)日糧為底物，加入基礎(chǔ)日糧0.8倍的水，副干酪乳酸桿菌接種比例為1/10000，混勻，密封發(fā)酵，制成乳酸菌發(fā)酵飼料。發(fā)酵溫度為37℃，發(fā)酵48h，飼料中副干酪乳酸桿菌數(shù)為1.656×1010CFU/g。試驗日糧由90%基礎(chǔ)日糧+10%發(fā)酵飼料制成。試驗日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3試驗設(shè)計及飼養(yǎng)管理注：

1.預(yù)混料，2.營養(yǎng)水平均為計算值。

選取100頭健康、體重(23.21士2.13)kg生長育肥豬(公、母各半)，隨機(jī)分為2組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)10頭豬。對照組育肥豬飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組育肥豬飼喂90%基礎(chǔ)日糧+10%乳酸菌發(fā)酵飼料。

試驗期30天。試驗期間，試驗豬自由采食、飲水，按照養(yǎng)殖場規(guī)定定期對生長育肥豬進(jìn)行免疫接種。

1.4測定指標(biāo)及方法

1.4.1生長性能

試驗開始和結(jié)束，對試驗生長育肥豬進(jìn)行稱重，每天收集并記錄采食量，計算平均日增重、平均日采食量、料重比。

平均日增重=(末重一初重)拭驗天數(shù)(1)

平均日采食量=總采食量/試驗天數(shù)(2)

料重比=平均日采食量/平均日增重(3)

1.4.2養(yǎng)分表觀消化率

試驗最后2天，在日糧中添加0.3%三氧化二鉻作為指示劑，每日采集試驗生長育肥豬100g糞便樣品，連續(xù)采集2天混合，-20℃保存，用于測定飼料和糞便中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和總能的含量，計算養(yǎng)分表觀消化率。

養(yǎng)分表觀消化率=(食入營養(yǎng)物質(zhì)量-對應(yīng)糞中營養(yǎng)物質(zhì)量)/食入營養(yǎng)物質(zhì)量×100%（4）1.4.3血清指標(biāo)

1.4.3.1血清生化指標(biāo)

每個重復(fù)隨機(jī)選取5頭豬，靜脈采血5mL用于檢測血清，血清于-80℃冰箱中保存。血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素氮(BUN)、膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）,葡萄糖(GLU)、膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、葡萄糖(GLU)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）按照試劑盒說明書進(jìn)行測定。

1.4.3.2免疫指標(biāo)

采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法測定結(jié)合珠蛋白(HP)、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A(IgA),免疫球蛋白M（IgM）、白細(xì)胞介素-1β（1L-1β）、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)含量。試劑盒購自美國BETHYL公司。

1.4.3.3抗氧化指標(biāo)

測定總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA），操作方法按照試劑盒(合肥萊爾生物科技有限公司)說明書。

1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用SPSS22.0進(jìn)行分析，檢驗進(jìn)行多重比較。結(jié)果以“平均值士標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P<0.05表示差異顯著。

2、結(jié)果與分析

2.1發(fā)酵飼料對生長育肥豬生長性能的影響(見表2)

由表2可知，試驗組生長育肥豬的末重、平均日增重、平均日采食量均顯著高于對照組(P<0.05)，料重比顯著低于對照組(P<0.05)。

2.2發(fā)酵飼料對生長育肥豬養(yǎng)分表觀消化率的影響(見表3)注:

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同字母表示差異顯著(P

由表3可知，試驗組生長育肥豬的粗蛋白、能量、干物質(zhì)、粗纖維、粗脂肪表觀消化率均顯著高于對照組(P<0.05)。

2.3發(fā)酵飼料對生長育肥豬血清生化指標(biāo)的影響(見表4)

由表4可知，試驗組生長育肥豬血清TP、GLB含量顯著高于對照組(P<0.05)，血清BUN、TC、TG、GLU含量以及ALT活性顯著低于對照組(P

由表5可知，與對照組比，試驗組生長育肥豬血清IgG、IgA、IgM含量顯著升高(P<0.05)，IL-Ip、IL-6、TNF-α含量顯著降低(P<0.05)，T-AOC及SOD活性顯著升高(P<0.05)，HP、MDA含量顯著降低(P<0.05)。2.4發(fā)酵飼料對生長育肥豬血清免疫、抗氧化指標(biāo)的影響(見表5)

3、討論

3.1發(fā)酵飼料對育肥豬生長性能的影響

乳酸菌是動物腸道中的重要菌群，對維持動物健康水平、調(diào)控機(jī)體免疫功能方面具有重要影響。乳酸桿菌廣泛存在于動物體表與體內(nèi)，在動物體內(nèi)可以競爭性抑制有害微生物侵襲與侵染，通過分解動物消化道內(nèi)難以吸收的成分并生成各種消化酶，增強(qiáng)動物對營養(yǎng)物質(zhì)的

消化吸收能力;將動物消化道與飼料中的非蛋白氮吸收并生成各種氨基酸和維生素;提高動物機(jī)體的免疫能力。研究發(fā)現(xiàn)，在禽畜日糧中加入乳酸菌可通過促進(jìn)豬的腸道發(fā)育，調(diào)節(jié)豬的腸道菌群，促進(jìn)豬對飼料中營養(yǎng)成分的吸收，有效提高豬的生長性能。本研究發(fā)現(xiàn)，使用發(fā)酵飼料生長育肥豬對飼料的消化率與利用率更高。

3.2發(fā)酵飼料對育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)能夠在一定程度上反映機(jī)體的代謝水平和器官功能。肝臟是合成血清總蛋白的場所，血清TP可作為機(jī)體的蛋白質(zhì)吸收水平指標(biāo)，而由漿細(xì)胞分泌的球蛋白可作為機(jī)體的免疫能力的判斷指標(biāo)之一。本研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料組豬血清TP、GLB含量明顯高于對照組，表明發(fā)酵飼料能夠提高生長育肥豬合成蛋白質(zhì)能力。血清TC可反映肝臟對脂肪代謝水平。本研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料組生長育肥豬的血清TC含量明顯低于對照組，表明發(fā)酵飼料可增強(qiáng)生長育肥豬的脂肪代謝能力。血清BUN是機(jī)體蛋白質(zhì)代謝最終產(chǎn)物，當(dāng)動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝良好，血清BUN應(yīng)處于低水平或下調(diào)狀態(tài)。本研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料組生長育肥豬的血清BUN含量明顯降低，表明發(fā)酵飼料可促進(jìn)生長育肥豬的蛋白質(zhì)代謝。血清ALT和AST可以反映機(jī)體肝臟功能，其活性過高時表明肝臟細(xì)胞可能受到損傷。本研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料組生長育肥豬血清中AST和ALT活性較低，表明發(fā)酵飼料可在一定程度上保護(hù)生長育肥豬的肝臟，進(jìn)而增強(qiáng)蛋白質(zhì)合成與吸收能力，提高生長育肥豬的生長性能。

3.3發(fā)酵飼料對生長育肥豬血清免疫指標(biāo)的影響

HP是一種急性期反應(yīng)蛋白，與禽畜感染、炎癥、免疫功能等與免疫力相關(guān)的疾病關(guān)系密切，豬血清HP含量越高，表明機(jī)體狀態(tài)越差。本研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料組豬血清HP含量較低，表明機(jī)體更健康。免疫球蛋白作為機(jī)體免疫功能的特異性指標(biāo)，可有效反映機(jī)體的免疫能力。發(fā)酵日糧可改善生長育肥豬體內(nèi)的免疫球蛋白水平，提高免疫力。本研究發(fā)現(xiàn)，使用發(fā)酵飼料后，生長育肥豬血清內(nèi)的HP、IgG、IgA、IgM含量均得到明顯改善。IL-6可誘導(dǎo)免疫B、T細(xì)胞增殖分化，作為一種炎癥標(biāo)記物參與機(jī)體的免疫；TNF-α由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，能夠激活淋巴細(xì)胞，是一種作用力極強(qiáng)的抗感染細(xì)胞因子。Bleau等研究表明，乳酸菌培養(yǎng)液中具有大量的胞外多糖，可顯著提高巨噬細(xì)胞對外源病毒、細(xì)菌等吞噬能力，降低IL-6和TNF-α含量。本研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料組豬血清IL-1p、TNF-a,IL-6含量均更低，表明發(fā)酵飼料可明顯降低炎癥反應(yīng)，提高機(jī)體免疫力。

當(dāng)動物機(jī)體受到損傷或刺激后，動物機(jī)體內(nèi)清除自由基的酶促系統(tǒng)發(fā)生針對性反應(yīng)，以維持動物機(jī)體氧化與還原的動態(tài)平衡。MDA是動物機(jī)體氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物，MDA水平上升表明機(jī)體內(nèi)氧化反應(yīng)激烈程度增強(qiáng)，從而損傷動物機(jī)體細(xì)胞。SOD是參與動物機(jī)體內(nèi)氧化一還原反應(yīng)的重要抗氧化酶，T-AOC是反映動物機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合性指標(biāo)。體內(nèi)T-AOC、SOD、GSH-Px活性升高可增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。李薛強(qiáng)等發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料可顯著提高母豬血清中T-AOC、GSH-Px活性，與本試驗結(jié)果相似。

4、結(jié)論

本研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料可有效提高生長育肥豬的生長性能，增強(qiáng)機(jī)體蛋白質(zhì)、脂肪合成與代謝能力，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能。

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發(fā)酵后飼料的適口性、營養(yǎng)、消化率較未發(fā)酵前有明顯提升。發(fā)酵后的飼料根據(jù)不同動物與不同飼養(yǎng)周期按照10%-50%與該動物其它全價飼料混合后飼喂（先少量飼喂適應(yīng)后逐漸增加的原則），不可以單獨(dú)飼喂或全部飼喂發(fā)酵飼料。

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