益生菌對(duì)豬腸道菌群的調(diào)控作用
張董燕* 季海峰 徐煒玲 趙國(guó)先
(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,河北保定 071001;
2.北京市農(nóng)林科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,北京 100089)
摘 要 本文綜述了豬腸道菌群的建立合分布、益生菌對(duì)腸道菌群的調(diào)控作用以及益生菌制劑的合理應(yīng)用。
關(guān)鍵字 豬 腸道菌群 益生菌
隨著腸道微生態(tài)學(xué)的發(fā)展,人們逐漸認(rèn)識(shí)到益生菌對(duì)于維持動(dòng)物腸道菌群平衡發(fā)揮著重要作用。本文綜述了豬腸道菌群的建立合分布、益生菌對(duì)腸道菌群的調(diào)控作用以及益生菌制劑的合理應(yīng)用等問題,旨在為益生菌的研究及相關(guān)產(chǎn)品開發(fā)提供知識(shí)儲(chǔ)備。
1 豬腸道菌群的建立及分布
仔豬出生時(shí)腸道內(nèi)是無菌的,分娩時(shí)由于受到母體產(chǎn)道、糞便及環(huán)境微生物的影響,在出生后的3~4 h, 腸道內(nèi)開始檢出大腸桿菌和鏈球菌。兼性厭氧菌作為第一批在仔豬腸道定植的菌株。在初生24 h之后,大腸桿菌和鏈球菌菌數(shù)達(dá)到最大值。48 h仔豬腸道內(nèi)開始出現(xiàn)可以在微氧環(huán)境中生存的乳酸桿菌;72 h專性厭氧菌、擬桿菌開始在腸內(nèi)定植。仔豬體內(nèi)的菌群發(fā)育情況因個(gè)體差異而有所不同。其種類和數(shù)量隨動(dòng)物年齡、食物、宿主對(duì)細(xì)菌、細(xì)菌與細(xì)菌之間相互作用而發(fā)生變化,這種變化存在整個(gè)生命過程中,并維持動(dòng)態(tài)平衡,形成正常菌群。一般認(rèn)為仔豬從出生到斷奶后腸道菌的組成一直在發(fā)生連續(xù)的變化,直到育肥期才趨于平衡。在育肥期豬的腸道內(nèi)至少發(fā)現(xiàn)有30多個(gè)屬、100多種細(xì)菌(顧君華和王欣,2003)。
初生仔豬胃內(nèi)pH為5,幾小時(shí)后降為3~4,5周時(shí)為2~3,其后相對(duì)穩(wěn)定,因此耐酸菌和兼性厭氧菌為優(yōu)勢(shì)菌,主要為乳桿菌和鏈球菌。小腸液是弱堿性混濁液體,pH值為8.2~8.7,十二指腸中的膽鹽能抑制其中的細(xì)菌數(shù)目,因此,十二指腸內(nèi)細(xì)菌數(shù)目較少,到達(dá)空腸和回腸后數(shù)目和種類逐漸增多。在豬的空腸和回腸內(nèi)容物中,以乳酸桿菌和雙歧桿菌為優(yōu)勢(shì)菌群,其次是消化球菌、腸球菌、小梭菌和葡萄球菌。大腸pH 接近中性,是豬消化道微生物活動(dòng)的主要場(chǎng)所。其中盲腸和結(jié)腸是細(xì)菌定值最大部位,主要由厭氧菌組成,如擬桿菌以及大量的革蘭氏陽(yáng)性菌。嚴(yán)格厭氧菌包括無芽孢菌(如真桿菌、雙歧桿菌、鏈球菌、消化鏈球菌、消化球菌等)和產(chǎn)芽孢菌(如梭菌、槌形菌等)(張名濤等,2003)。而兼性厭氧菌比厭氧菌少10~100倍,常見的兼性厭氧菌有鏈球菌和乳酸桿菌。
2 益生菌對(duì)豬腸道菌群的調(diào)控作用
2.1 抑制病原菌的作用
2.1.1 與病原菌競(jìng)爭(zhēng)黏附位點(diǎn)和營(yíng)養(yǎng)
黏附能力通常被認(rèn)為是病原菌的一種重要的毒性因子(Firday和Falkow,1997),致病菌與腸道黏膜表面受體結(jié)合粘附于腸道黏膜,是其定植并產(chǎn)生臨床癥狀的前提條件。因此,許多益生菌可以通過與致病菌競(jìng)爭(zhēng)腸上皮微絨毛上的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)上的相同復(fù)合糖(glycoconjugate)受體來達(dá)到阻止致病菌的定植(李樹鵬和趙獻(xiàn)軍,2004)。而營(yíng)養(yǎng)的競(jìng)爭(zhēng)發(fā)生在小腸上皮細(xì)胞,主要是由于益生菌能夠搶先吸收利用小腸上皮細(xì)胞內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行生存和繁殖,抑制有害菌在消化道的增殖。
研究表明,益生菌可以黏附于微絨毛的刷狀緣和黏膜層而不被腸蠕動(dòng)沖走,并且參與其與致病菌之間生存與繁殖的時(shí)空競(jìng)爭(zhēng)、定居部位競(jìng)爭(zhēng)以及營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng),限制致病菌群的生存繁殖。Jin(1996a和1996b)報(bào)道乳酸菌可競(jìng)爭(zhēng)性地抑制病原菌對(duì)腸粘膜的粘附,從而降低病原菌對(duì)宿主的侵害。Muralidhara等(1997)給剛出生的仔豬飼喂乳酸桿菌可以減少大腸桿菌的數(shù)目,試驗(yàn)結(jié)果證明糞便中乳酸桿菌與大腸桿菌的比例達(dá)到1280:1,而沒有飼喂乳酸桿菌組,其比例為2:1,此比例的提高可以保護(hù)動(dòng)物抵抗腸致病性大腸桿菌的侵襲,預(yù)防腹瀉。
2.1.2 產(chǎn)生抑制病原菌生長(zhǎng)的物質(zhì)
乳酸菌通過自身以及代謝產(chǎn)物與其它的微生物之間的相互作用,調(diào)整菌群之間的關(guān)系,維持和保證微環(huán)境中微生物群最佳優(yōu)勢(shì)組合以及這種組合的相對(duì)穩(wěn)定。某些乳酸桿菌和鏈球菌可產(chǎn)生細(xì)菌素(bacterin)、過氧化氫、二氧化碳、有機(jī)酸等(Robinson和Tamime,1990;Mishra和Lambert,1996),它們?cè)隗w外具有抑制沙門氏菌(Salmonella)、志賀氏菌(Shigella)、葡萄球菌(Staphylococcus)、變形菌(Proteus)、假單胞菌(Pseudomonas)和大腸埃希氏菌(E.coli)屬細(xì)菌生長(zhǎng)的作用(Gilliland和Speck,1977;Ozbas和Aytae,1995)。
如乳酸乳球菌產(chǎn)生的Nisin細(xì)菌素可抑制鏈球菌、葡萄球菌及梭狀芽孢桿菌的生長(zhǎng),嗜酸乳桿菌產(chǎn)生的分子量為3 500的肽能抑制大腸桿菌DNA的合成,乳酸桿菌產(chǎn)生的細(xì)菌素可以特異性地抑制革蘭陽(yáng)性菌(Alakomi等,2000)等;嗜酸乳桿菌、乳酸乳桿菌等可產(chǎn)生過氧化氫抑制葡萄球菌(Staphylococcus)的生長(zhǎng)繁殖,使有益菌在細(xì)菌的種間競(jìng)爭(zhēng)中占優(yōu)勢(shì)。
Williams指出,在母豬日糧中添加益生菌可增加腸道內(nèi)揮發(fā)性有機(jī)酸和細(xì)菌發(fā)酵終產(chǎn)物的產(chǎn)量,為母豬提供更多的能量,有助于母豬養(yǎng)分利用和產(chǎn)奶量的增加(杜晉平,2002)。張國(guó)龍等(1994)在35日齡斷奶仔豬日糧中添加0.2%~0.4%的蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)品,糞便中大腸桿菌總數(shù)明顯降低。
2.2 對(duì)腸道的營(yíng)養(yǎng)作用
益生菌能直接產(chǎn)生多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如維生素、氨基酸、短鏈脂肪酸、促生長(zhǎng)因子等,參與動(dòng)物體的新陳代謝,有的微生物在動(dòng)物體內(nèi)生長(zhǎng)繁殖時(shí)能合成核黃素、泛酸、葉酸、VBl2等B族維生素,參與機(jī)體某些重要的代謝反應(yīng)。益生菌產(chǎn)生的揮發(fā)性脂肪酸為大腸粘膜代謝提供了能源,也使腸道pH值和氧化還原電勢(shì)降低,有利于礦物質(zhì)鈣、鐵、鎂、鋅等的吸收(楚渠和彭云武,2004)。
給豬飼喂益生菌后,能夠使小腸粘膜皺裂增多,絨毛長(zhǎng)度增加,粘膜隱窩加深,小腸吸收面積增大,從而更加充分的吸收和轉(zhuǎn)化飼料,以提高生產(chǎn)性能。
2.3 免疫作用
2.3.1 益生菌與體液免疫
SIgA是黏膜體液免疫的主要效應(yīng)因子,它能預(yù)防腸道蛋白酶的分解,形成黏膜上的抗體。它經(jīng)腸黏膜上皮細(xì)胞釋放到腸腔內(nèi)與腸黏膜表面的正常菌群混合存在,其在外分泌液中以雙鏈和四鏈的形式存在,具有多鏈性、粘膜親和性與抵抗蛋白酶作用的特性,比單鏈IgA更有抗原結(jié)合力,與IgA和IgG相比,SIgA可以從空間構(gòu)象上阻止病毒的附著,從而中和細(xì)菌毒素,限制細(xì)菌的繁殖,維持腸道內(nèi)的正常菌群平衡,在局部抗感染過程中起關(guān)鍵作用(李樹鵬和趙獻(xiàn)軍,2004)。當(dāng)SIgA抗體分泌增強(qiáng)時(shí),提高免疫識(shí)別力,并誘導(dǎo)T、B淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生細(xì)胞因子,通過淋巴細(xì)胞再循環(huán)而活化全身免疫系統(tǒng),從而增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。乳酸桿菌的代謝物和整個(gè)細(xì)胞等抗原物質(zhì)能通過M細(xì)胞進(jìn)入PP,激活Th2細(xì)胞,產(chǎn)生大量的IL-5,而IL-5是有效的IgA產(chǎn)生因子,能激活PP生發(fā)中心的B細(xì)胞,使其轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞,在生產(chǎn)Ig的過程中向IgA 轉(zhuǎn)化,從而使得SIgA水平上升。
Perdigon等(1991)研究證明干酪乳桿菌能促進(jìn)腸道分泌免疫球蛋白IgA,增強(qiáng)宿主腸粘膜的腸道粘膜反應(yīng)。Lessard和Brisson(1987)給斷奶仔豬飼喂乳桿菌后,接種傳染性胃腸炎病毒疫苗,試驗(yàn)組血清中的特異性抗體IgG水平顯著高于對(duì)照組。
2.3.2 益生菌與細(xì)胞免疫
研究表明,益生菌能激活腸黏膜中巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和NK細(xì)胞的功能,增強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答?;钚越湍改軌蛱岣呙庖邫C(jī)能可能與其胞壁物質(zhì) ( 即β-葡聚糖和磷酸化甘寡糖)和胞內(nèi)活性肽有關(guān)(Indegrrew,1999),β-葡聚糖能提高動(dòng)物細(xì)胞免疫能力,可能歸因于添加后刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)育,導(dǎo)致巨噬細(xì)胞大量增生,后者通過噬菌作用破壞微生物和抗原的入侵(Macdonald,1995)。乳酸菌能夠激活巨噬細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞,增加IL-1、IL-2、IL-6、IL-5,TNF-a等細(xì)胞因子的產(chǎn)生量。
雙歧桿菌具有免疫賦活作用,能激活機(jī)體免疫系統(tǒng)中N K 細(xì)胞和B 淋巴細(xì)胞,另外還能激活機(jī)體單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng),促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬和殺菌功能。其機(jī)理可能是雙歧桿菌可易位進(jìn)入血液循環(huán),被單核巨噬細(xì)胞吞噬,從而激活單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)。
據(jù)報(bào)道,口服或者腹腔注射乳酸桿菌能明顯提高仔豬巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的活性,引起白細(xì)胞數(shù)和血清總蛋白(主要是球蛋白)濃度的提高,增加小腸與結(jié)腸粘膜表面抗體的生成,從而有效提高機(jī)體的抵抗能力。
3 益生菌制劑的合理應(yīng)用
3.1 益生菌制劑所使用的微生物菌種及分類
我國(guó)目前允許使用的飼料級(jí)微生物菌種有15種。優(yōu)良菌種需具備的條件有:(1)對(duì)動(dòng)物和人體無毒、無害、安全和無副作用;(2)具有存活能力并能進(jìn)行工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn);(3)經(jīng)加工后活菌存活率高、穩(wěn)定性好;(4)有利于促進(jìn)宿主的生長(zhǎng)發(fā)育及提高抗病能力。
目前常用的益生菌種類主要有(1)乳酸菌:乳酸菌(Lactic acid bacteria)是一類可以分解糖類產(chǎn)生乳酸的總稱。目前已發(fā)現(xiàn)的這一類菌在細(xì)菌分類學(xué)上有18個(gè)屬,其中有益菌以乳桿菌屬、雙歧桿菌屬為代表,已被證實(shí)在臨床上能夠治療和預(yù)防人和動(dòng)物的某些腸道疾病或者起保健作用(黃慶生和王加啟,2002)。(2)芽孢桿菌(Bacillus):芽孢桿菌是一類好氧菌,在一定條件下產(chǎn)生芽孢。目前使用的菌株有枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、東洋芽孢菌等。(3)酵母菌(yeast):飼用酵母的種類主要有熱帶假絲酵母、產(chǎn)阮假絲酵母、啤酒酵母、紅色酵母等。
3.2 益生菌制劑的安全性
益生菌安全性評(píng)價(jià)一般包括病原性、毒性、代謝活性及菌株內(nèi)在特性作為指標(biāo)。現(xiàn)在多采用無特定病原和無菌動(dòng)物來研究菌株的病原性及毒性,關(guān)于益生菌代謝活性安全性研究主要集中在它們是否產(chǎn)生氨、胺、吲哚、苯酚、致癌亞膽酸及降解黏膜的酶類上,通過細(xì)胞凝集活性來評(píng)價(jià)細(xì)菌表面特性。
雖然目前對(duì)益生菌安全性并沒有公認(rèn)的解釋,但綜合目前對(duì)益生菌的研究對(duì)益生菌安全性可以獲得如下的認(rèn)識(shí):益生菌一定不能是致病菌而且不能產(chǎn)生有害物質(zhì),菌株不能通過遺傳修飾獲得有害基因或者具有把有害基因轉(zhuǎn)移的潛力(袁鐵崢和姚斌,2004)。
4 小結(jié)
綜上所述,益生菌制劑能夠抑制腸道病原菌的生長(zhǎng)與繁殖,從而起到保健和治療的作用。目前,益生菌制劑已廣泛應(yīng)用于我國(guó)養(yǎng)豬生產(chǎn)中,然而大部分主要是益生素制劑對(duì)豬的生產(chǎn)性能方面的研究,而關(guān)于豬的免疫等方面的報(bào)道較少。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,利用基因工程技術(shù)培育出高質(zhì)量的菌株來提高飼喂效果以及深入研究微生態(tài)制劑對(duì)豬免疫功能的影響極其作用機(jī)制成為今后發(fā)展的重點(diǎn)。
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49.來賓市武宣縣方老板運(yùn)用自制發(fā)酵中草藥養(yǎng)豬防控非瘟和替抗保健效果好,重燃養(yǎng)豬信心和希望
50.北海市合浦縣陳老板采用中草藥防非瘟替抗養(yǎng)殖黑豬效果好、效益高
51.四川宜賓陳老板運(yùn)用發(fā)酵中草藥替抗防非病少豬豬健康程度高,膽大心細(xì)快速?gòu)?fù)養(yǎng)且進(jìn)行自繁自養(yǎng)帶來顯著經(jīng)濟(jì)效益
52.南寧橫縣鄭老板運(yùn)用中草藥成功復(fù)養(yǎng)土豬、黑豬經(jīng)驗(yàn)分享
53.廣西百色靖西市楊老板長(zhǎng)期使用發(fā)酵中草藥喂養(yǎng)豬群躲過非瘟效益好
54.更多案例→養(yǎng)殖成功案例 →小型豬場(chǎng)與散養(yǎng)戶如何運(yùn)用中草藥等措施來防控非洲豬瘟;→采用干濕料、粥料、部分發(fā)酵飼料的豬場(chǎng)、傳統(tǒng)豬場(chǎng)有效防控非洲豬瘟方案,有大量成功案例;→自動(dòng)供料系統(tǒng)規(guī)模豬場(chǎng)、飼喂干料全價(jià)飼料豬場(chǎng)、自配料干料飼喂豬場(chǎng)防控非洲豬瘟方案
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防控非洲豬瘟廣西助農(nóng)公司提供一站式服務(wù)。在廣西區(qū)域可以簽訂復(fù)養(yǎng)、續(xù)養(yǎng)合同,發(fā)生非瘟死亡超過10%全額賠付;你的豬場(chǎng)發(fā)生疑似感染非瘟我公司控制下來再付款。同時(shí)幫助你的豬場(chǎng)進(jìn)行混合豬病的凈化和快速解決環(huán)保問題,提供上門技術(shù)服務(wù),大量成功案例可以驗(yàn)證。
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